国产新药凯美纳对三种鼻咽癌细胞株增殖抑制的实验研究

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目的:通过观察国产新药凯美纳处理鼻咽上皮细胞株 NP-69及鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-2、SUNE-1后观察细胞的凋亡情况及细胞EGFR的表达情况,了解凯美纳对鼻咽癌细胞株增殖的影响,并进一步探讨药物作用的可能机制。  方法:  (1)MTT法检测凯美纳处理细胞后的细胞增殖及凋亡情况,选择最适作用浓度和作用时间。  (2)FCM检测凯美纳作用于鼻咽癌细胞株后的细胞凋亡和细胞周期分布情况。  (3)WB检测凯美纳处理鼻咽癌细胞后的EGFR表达情况。  (4)ARMS检测凯美纳处理细胞后的EGFR基因突变情况。  结果:  (1)凯美纳对鼻咽癌细胞株的增殖具有抑制作用,其最适作用浓度为0.3umol/L。凯美纳对细胞株增殖的抑制作用在24h较6h、12h明显。  (2)凯美纳处理各细胞株后,CNE-2细胞株的凋亡比例明显高于其他细胞株,具有统计学差异。  (3)凯美纳可使阻滞于CNE-2细胞G0/G1期。  (4)凯美纳处理各细胞株后,CNE-2细胞株EGFR表达明显高于其他细胞株。  (5)ARMS检测发现EGFR基因阳性突变位于19Del与21L858R。  结论:凯美纳对鼻咽癌各细胞株均具有抑制作用,以对CNE-2细胞株的增殖抑制作用最强;凯美纳处理各细胞株后,CNE-2细胞的凋亡明显增加,细胞阻滞于G0/G1期;而研究发现EGFR在CNE-2细胞株中呈高水平表达,且检测到鼻咽癌细胞株中EGFR基因阳性突变主要位于19Del与21L858R。本研究结果显示凯美纳对鼻咽癌细胞株具有明显的抑制作用,其作用机制可能是通过EGFR发挥效应的,因此,EGFR可能为鼻咽癌防治的重要潜在靶点。
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