金花茶变异单株性状调查与胚芽愈伤组织诱导方法研究

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四季金花茶(Camellia perpetua S.Y.Liang et L.D.Hang)和金花茶(Camellia petelotii(Merr.)Sealy)是广西特有珍稀植物,具有很高的观赏价值和经济价值。本课题组前期经过野外实地调查,在防城港十万大山上那杨村农户的金花茶种植场发现了“牡丹型”和“心型”两棵疑似实生苗变异单株,对这两株变异单株进行了性状测试,为后续新品种鉴定提供参考依据。同时,为了提高金花茶(原种)和四季金花茶的繁殖系数,培育壮苗,探索金花茶(原种)和四季金花茶胚芽愈伤组织诱导的最佳方法。研究的主要内容和结果如下:(1)通过解剖观察金花茶(原种)和两株变异单株在不同时期花蕾内轮花瓣形态,结果显示,在7月和9月份“牡丹型”金花茶花蕾内轮花瓣有内折现象,但5月份“牡丹型”金花茶花蕾内轮花瓣没有内折现象;再通过石蜡切片观察5月份金花茶(原种)和两株变异单株花蕾的内轮花瓣纵切面,结果显示,“牡丹型”金花茶无内折现象,造成这个现象的原因可能是“牡丹型”金花茶不同分化时期的花蕾内轮花瓣形态有差异,内折现象可能在花蕾分化后期形成。但三者内轮花瓣纵切面的弯曲弧度有所不同,且“牡丹型”的弧度较大,三者的内轮花瓣纵切面结构为典型上下表皮和中间组织的结构,三者的纵切面细胞结构类似。(2)性状调查结果显示两株变异单株的叶片特征和花部特征均与金花茶(原种)的有差异区别,且“牡丹型”与金花茶(原种)的叶片和花部特征差异较大。在叶部特征方面,叶片形状、叶尖形状、叶尖长度、叶基形状以及叶缘锯齿都有明显差异。在花部特征方面,花冠直径、花冠高度、内外轮花瓣形状、内外轮花瓣长度、内外轮花瓣脉纹明显程度、内轮花瓣卷曲程度以及花瓣向外翻卷程度、苞片形状和雄蕊数量都有明显差异。(3)以四季金花茶和金花茶种子为外植体,分别设置不同浓度Hg Cl2和灭菌时间,采用3种不同成熟度种子,9个不同浓度激素组合处理,对四季金花茶和金花茶胚芽诱导愈伤组织进行研究。结果表明,四季金花茶和金花茶外植体灭菌最佳方法均为0.1%的Hg Cl2消毒8min;四季金花茶采用成熟度中等的种子(直径在0.5~0.8㎝)作为外植体培育在WPM培养基中28天时胚芽生长效果最佳,激素IAA诱导四季金花茶愈伤组织效果较好;金花茶采用完全成熟的种子(直径>1.0cm)作为外植体培育在WPM培养基中28天时胚芽生长效果最佳,激素NAA诱导金花茶愈伤组织效果较好。综上所述,金花茶(原种)与两株变异单株通过石蜡切片观察花瓣纵切面形态和细胞结构以及结合DUS测试性状调查并观察叶部和花部特征,综合分析表明“牡丹型”金花茶多数性状较金花茶(原种)差别较大,存在变异可能性较大。通过对四季金花茶和金花茶(原种)进行离体培养研究,得到了诱导四季金花茶和金花茶(原种)愈伤组织的最佳方法,为建立四季金花茶和金花茶(原种)的再生体系提供参考。
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