目的：（1）研究和分析大剂量甲氨喋呤（HDMTX）化疗对急性白血病患儿肠道菌群的影响；（2）探讨16SrRNA／DNA荧光定量PCR技术在临床细菌定量分析中可行性。方法：（1）提取36例健康儿童和36例急性淋巴细胞白血病患儿行大剂量甲氨喋呤化疗前后粪便标本的细菌DNA，测量和比较对照组和观察组标本细菌的OD₂₆₀值；（2）采用16SrRNMDNA荧光定量PCR技术对对照组和观察组粪便标本中的双歧杆菌和大肠杆菌进行定量分析和比较。结果：（1）大便标本中细菌的OD₂₆₀值分别为：对照组3479.3±870.5ng／μl，观察组化疗前1天2436.3±768.6 ng／μl，化疗后第3天1496.5±577.1 ng／μl，化疗后第7天1966.6±598.3 ng／μl；对照组和观察组以及观察组化疗前后相比，均有显著差异（P＜0.01）；（2）大便标本中双歧杆菌对数值分别为：对照组9.49±0.41，观察组化疗前1天7.24±0.33，化疗后第3天6.00±0.27，第7天6.59±0.33；大肠杆菌对数值分别为对照组7.52±0.43，观察组化疗前1天6.62±0.42，化疗后第3天5.96±0.42，第7天7.02±0.41；对照组和观察组以及观察组化疗前后，大便标本中双歧杆菌和大肠杆菌数量的对数值均有显著差异（P＜0.01），其中观察组较对照组、观察组化疗后较化疗前的双歧杆菌和大肠杆菌数量均有明显减少，化疗后第3天尤显，而第7天较第3天有所回增。结论：（1）大剂量甲氨喋呤化疗方案对急性白血病患儿肠道双歧杆菌和大肠杆菌有明显影响，化疗后数量显著下降；（2）急性白血病患儿肠道菌群和健康儿童相比有显著差异，细菌总数和益生菌量都有明显减少，可能与长期化疗及抗生素等因素有关；（3）16SrRNA／DNA荧光定量PCR技术在临床细菌定量分析中切实可行。