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有机磷农药在控制农作物害虫和病虫方面占据重要的地位,是世界上生产和使用最多的农药品种。有机磷农药的毒性及不规范的使用,是造成土壤农药污染的主要因素,直接或间接地危害人类的健康。因此,开展污染土壤的修复技术研究意义重大。本研究从受农药长期污染的土壤中筛选出长势较好的3株野生种菌,分别为A1、A2和A3。根据细菌形态观察和生理生化实验结果,结合细菌16S rDNA的基因序列分析,参考《伯杰细菌鉴定手册(第八版)》,确定3种菌株均为芽孢杆菌科,梭菌属的微生物,其中A1为巴氏梭菌(Bacillus pasteurii), A2为丁酸梭菌(Clostridium butylicum),A3为丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutylicum)。通过初步驯化,3株菌株中A3菌对甲基对硫磷的耐受浓度最高可达500mg/L。因此,以A3为研究对象,确定了菌株A3的最佳生长条件为：最佳温度为35℃、最佳起始pH值7.0左右、最佳摇床转速120r/min、最佳C、N源分别为淀粉和酵母膏；菌株A3在牛肉膏蛋白胨液体培养基中培养时,8h时生长较快,延缓期不明显,对数增长期较长,72h达到最大生物量。通过开展3种菌株降解甲基对硫磷的进程实验、耐受性实验和甲基对硫磷底物浓度对降解影响的实验研究,得到3种菌A1、A2和A3在12h时对甲基对硫磷的最大降解率,分别为73.04%、78.05%和85.51%。甲基对硫磷对A2和A3的最大抑制浓度为600mg/L和800mg/L。对A3菌株的传代实验研究表明：A3菌比较稳定,不易变异。本文还系统研究了固定化A3菌株对甲基对硫磷的降解作用及影响因素,确定了最佳固定化方法为交联法,载体为玉米芯,最佳交联剂浓度为0.5%。当降解时间为12h,pH值为7时,固定化菌株对甲基对硫磷的降解作用最好,最大降解率为85.21%。本研究为农药污染土壤的生物修复技术应用奠定了基础,具有一定的实际应用价值。