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第一部分肺癌患者的外周血淋巴细胞替代肿瘤细胞体外药敏实验的研究目的：非小细胞肺癌（NSCLC）约占肺癌病理类型的80%。化学治疗在NSCLC以手术为主的综合治疗中占有重要地位。但在临床实际工作中，经常遇到病理类型相同的患者对相同化疗药物的敏感性却不尽相同，甚至有较大差别。近年来文献报道肿瘤细胞体外药敏实验指导化疗（个体化化疗）比传统化疗有显著疗效，可以提高患者的生活质量和远期存活率。然而由于肺癌早期不易发现，前来就诊者，往往已经失去手术机会；或由于各种原因无法得到足够量的肺癌组织标本；多次化疗的肺癌患者效果差疑似耐药；上述情况均无法进行肺癌细胞体外药物敏感试验，如何进行个体化化疗？研究证实：多个器官恶性肿瘤细胞与自身外周血淋巴细胞在体外药物敏感性上有着良好的正相关性。然而对于患者自身外周血淋巴细胞及肺癌细胞的体外药敏相关性却研究很少。本实验行患者自身外周血淋巴细胞和非小细胞肺癌原代细胞的药物敏感性实验，检验两者是否具有相关性，探讨用患者自身外周血淋巴细胞的药敏实验结果替代肺癌细胞药敏实验结果的可行性。方法：对60例术前未经任何治疗的非小细胞肺癌患者的肺癌细胞和自身外周血淋巴细胞进行体外原代培养。培养48h后行四氮唑盐（MTT）比色法检测这些细胞对卡铂、长春新碱、5-氟脲嘧啶、环磷酰胺等临床常用化疗药物的敏感性。结果：1细胞形态学：实验组肺癌细胞较对照组肺癌细胞数目明显减少，排列疏松，有较多死亡细胞。实验组淋巴细胞较对照组淋巴细胞数目明显减少、折光性变差。2药敏试验：2.1通过药物对肺癌细胞的平均抑制率进行判断：鳞癌对卡铂、五氟尿嘧啶敏感，对长春新碱、环磷酰胺不敏感。腺癌对卡铂、长春新碱、五氟尿嘧啶敏感，对环磷酰胺不敏感。2.2肺癌患者外周血淋巴细胞对卡铂、五氟尿嘧啶、长春新碱敏感，对环磷酰胺不敏感。2.3同一种化疗药物卡铂、长春新碱、五氟尿嘧啶、环磷酰胺对患者肺癌细胞和自身外周血淋巴细胞的抑制率之间具有良好的正相关性。相关系数分别为：0.701、0.668、0.543、0.696，且有统计学意义（P<0.05）。2.4根据60例肺癌细胞和自身外周血淋巴细胞对化疗药物的敏感率（敏感率=敏感病例数/病历总数×100%）来分析：患者肺癌细胞和自身外周血淋巴细胞对相同化疗药物卡铂、长春新碱、五氟尿嘧啶、环磷酰胺的敏感率无显著性差异，X2值分别为0.786、1.645、0.263、0.261，且均无统计学意义（P＞0.05）。结论：1肺癌患者的外周血淋巴细胞和肺癌细胞对相同的化疗药物敏感性具有良好的正相关性。2当肺癌患者已失去手术机会、或由于各种原因实体瘤标本无法取得时可以用外周血淋巴细胞对化疗药物的敏感性替代肿瘤细胞进行药物筛选。第二部分肺癌细胞体外药敏差异性的机制研究目的:采用免疫组织化学染色方法检测切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complementation group1, ERCC1)、肺癌耐药蛋白(lung cancer resistance protein, LRP)、胸苷磷酸化酶（Thymidinephosphorylase, TP）在上述非小细胞肺癌组织中的表达水平，分析肺癌细胞药物敏感性差异与上述耐药相关蛋白表达水平之间是否具有相关性，进一步探索药物敏感性差异的可能分子机制。方法：对上述60例非小细胞肺癌的石蜡组织进行免疫组织化学染色，检测ERCC1、LRP、TP三种基因的表达水平。结果：1免疫组织化学染色：1.160例肺癌患者中ERCC133例阳性，阳性率为55.0%。其中鳞癌阳性率为41.2%(14/34)，腺癌阳性率为73.1%(19/26)，腺癌阳性率高于鳞癌，而且经统计学检验ERCC1在鳞癌与腺癌中的表达有显著性差异（x~2=6.058，P=0.014）。1.260例肺癌患者中LRP28例阳性，阳性率为46.7%(28/60)。其中鳞癌阳性率为35.3%(12/34)，腺癌阳性率为61.5%(16/26)，腺癌阳性率高于鳞癌，而且经统计学检验LRP在鳞癌与腺癌中的表达有显著性差异（x2=4.077，P=0.043）。1.360例肺癌患者中TP27例阳性，阳性率为45.0%。其中鳞癌阳性率为44.1%(15/34)，腺癌阳性率为46.2%(12/26)，腺癌阳性率高于鳞癌，但经统计学检验TP在鳞癌与腺癌中的表达无显著性差异（x2=0.025，P=0.875）。1.4ERCC1表达阴性患者，其卡铂的敏感性明显高于ERCC1表达阳性者，且有统计学意义（P<0.05）。1.5LRP表达阴性患者，其环磷酰胺的敏感性明显高于LRP表达阳性者，且有统计学意义（P<0.05）。1.6TP阳性表达患者，其五氟尿嘧啶的敏感性明显高于TP表达阴性者，且有统计学意义（P<0.05）。结论：1ERCC1高表达可能是肺癌对铂类耐药的主要因素；LRP高表达可能是肺癌对环磷酰胺耐药的主要因素；TP高表达可能是肺癌对五氟尿嘧啶敏感的主要因素。2耐药相关蛋白的表达水平可以作为预测化疗药物是否敏感的指标。耐药相关蛋白的表达水平可能是造成肺癌患者对化疗药物敏感性差异的主要因素。