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目的1 建立糖尿病大鼠模型,研究活性维生素D-1,25（OH）2D3（Vit D）干预不同剂量和不同时间对糖尿病大鼠糖脂代谢指标、胰岛素水平、转氨酶水平和肝炎症因子水平的影响。2 探究Vit D改善糖尿病大鼠肝脏炎症损伤的分子机制。3 通过si-RNA技术,下调LO2细胞中维生素D受体（vitaminDreceptor,VDR）表达,探究Vit D/VDR信号在炎症应激中的调控作用。方法1 糖尿病模型构建和分组:120只4周龄SFP级、雄性SD大鼠,按体重随机选取16只作为正常对照组（NC组）,全程给予普通饲料喂养;其余大鼠给予高糖高脂饲料喂养5 w后,于腹腔注射35 mg/kg的链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）以构建糖尿病大鼠模型（以注射后24 h、72 h和1 w时三次随机血糖均≥16.7 mmol/L为成模标准）;将成模大鼠按体重和血糖随机分为:模型对照组（MC组）、高剂量干预组（H VitD组）、中剂量干预组（M VitD组）和低剂量干预组（L VitD组）;NC组和MC组大鼠每日给予2m1/kg的玉米油灌胃,H、M和LVitD组大鼠分别给予溶有0.3、0.15和0.075 μg/kg剂量1,25（OH）2D3的玉米油,以2 ml/kg剂量灌胃;干预时间分别持续4 w和12w。2 每周监测大鼠体重;分别于干预-2、0、4和12 w后,入代谢笼,计算大鼠24 h进食量、饮水量和尿量。3 干预结束后,腹主动脉采血,收集肝组织;全自动生化分析仪测定血清空腹血糖（FBG）、血脂谱水平（TC、TG、HDL-C和LDL-C）、转氨酶水平（AST和ALT）;ELISA试剂盒测定血清25（OH）D、胰岛素和肝组织匀浆中炎症因子（TNF-α、IL-1β和IL-6）浓度;HE染色检测肝组织病理变化;Trizo1法提取肝组织总RNA,实时荧光定量PCR测定肝组织中Vdr和NF-κB信号通路关键分子（Ikkβ、Iκbα和p65）mRNA的相对表达量;WB测定肝组织中VDR、IKKβ、IκBα、p-IκBα、胞浆p65和核p65蛋白表达量;双标免疫荧光检测VDR和IκBα蛋白在肝细胞中定位。4 以33.3 mmol/L葡萄糖联合0.1 mmol/L棕榈酸（HGPA）刺激LO2细胞24 h,以建立体外炎症模型;分为对照组（Control group）、模型组（HGPA）和干预组（HGPA+Vit D）,分别检测LO2细胞中和上清液中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平。5 合成si-VDR序列,借助GP-siRNA-Mate plus转染LO2细胞,检测VDR表达下调后LO2细胞中炎症因子（TNF-α、IL-1β和IL-6）和NF-κB信号通路分子（IKKβ、IκBα、p65）mRNA和蛋白表达水平。6 提取Control组、HGPA组和HGPA+Vit D组蛋白,采用免疫共沉淀法检测VDR和IκBα之间的相互作用。7 所有符合正态分布的计量资料结果以均数±标准差（x±s）表示,两组之间均数比较采用独立样本t检验,多组之间均数比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA）,并由LSD-t检验或Tukey检验进行组间均数两两比较,P<0.05视为差异有统计学意义。结果1 高糖高脂喂养联合小剂量STZ建立稳定的糖尿病大鼠模型,模型具有FBG升高、血脂代谢异常、多饮、多食、多尿和体重减轻等特征;干预4 w和12 w后,与MC组相比,HVitD组可减缓糖尿病大鼠体重下降（P<0.05）;干预12w后,与MC组相比,VitD各剂量干预组糖尿病大鼠24 h饮水量和尿量分别下降23.8%-31.8%和18.6%-26.7%（P<0.05）。2 与MC组相比,干预4 w后L VitD组和干预12 w后M、L VitD组糖尿病大鼠FGB显著降低（P<0.05）;干预12 w后,VitD各剂量干预组胰岛素水平显著升高（P<0.05）;干预12 w后,H VitD组TC和TG水平显著降低（P<0.05）,干预4 w和12 w后,Vit D各剂量干预组HDL-C和25（OH）D水平显著升高（P<0.05）,但各组大鼠LDL-C水平无显著性差异（P>0.05）。3 与MC组相比,干预4 w后,Vit D各剂量干预组转氨酶AST和ALT水平分别下降 20.9%-46.9%和 17.1%-19.2%（P<0.05）;干预 12w 后,VitD 各剂量干预组肝TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著下降（P<0.05）。4 HE染色结果显示,与MC组相比,在干预4 w和12 w后,Vit D各剂量干预组肝组织病理评分均显著下降（P<0.05）;免疫荧光结果显示,VDR主要分布于细胞核内,IκBα主要分布于胞浆中,在干预12 w后,H VitD组可见IκBα向细胞核靠近,并入核与VDR结合。5 与MC组相比,干预4w和12w后,H和MVitD组VDR mRNA和蛋白表达水平均显著上调（P<0.05）,Vit D各剂量干预组IκBα和p65 mRNA表达水平均显著上调（P<0.05）;Vit D各剂量干预组p-IκBα/IκBα和核p65/胞浆p65蛋白比值显著下降（P<0.05）。6 与Control组相比,HGPA刺激LO2细胞24 h后,LO2细胞中TNF-α、IL-1β和IL-6水平分别升高84.1%、61.7%和82.2%（P<0.05）;与HGPA组相比,1,25（OH）2D3 和 HGPA共培养 LO2 细胞 24 h后,TNF-α、IL-1β 和 IL-6 表达水平分别下降 31.3%、36.8%和 28.4%（P<0.05）,表明 1,25（OH）2D3 可以抑制 HGPA诱导的炎症激活。7 RT-PCR和WB结果表明,与阴性对照组相比,转染siVDR-homo-1414序列后VDR mRNA和蛋白表达水平分别下调74.3%和72.2%（P<0.05）;与野生型（WT组）HGPA组相比,转染后（si-VDR组）HGPA组TNF-α、IL-1 β和IL-6表达水平显著升高（P<0.05）,表明VDR下调后增强了 HGPA诱导的LO2细胞炎症激活。8 免疫共沉淀结果显示,HGPA单独培养LO2细胞24 h后,未检测到VDR和IκBα结合;而1,25（OH）2D3和HGPA共培养LO2细胞24 h后,检测到VDR和IκBα结合,表明1,25（OH）2D3干预可以增强或催化VDR与IκBα结合。结论1 1,25（OH）2D3能够缓解糖尿病大鼠体重过度下降,改善多饮和多尿症状,降低糖尿病大鼠FBG,改善血脂代谢紊乱状态,但各剂量组之间未呈现出明显的剂量和时间依赖性。2 1,25（OH）2D3可降低糖尿病大鼠转氨酶和肝组织炎症因子水平;同时还可以改善肝组织病理损伤,减轻炎性浸润,该作用可能与VDR/NF-κB信号通路有关。3 1,25（OH）2D3可抑制由高糖高脂诱导的LO2细胞炎症反应,该保护作用可能与1,25（OH）2D3介导的VDR和IκBα相互结合有关。