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本文采用双向凝胶蛋白电泳(2-DE)结合MALDI-TOF-MS质谱分析,研究人大肠癌高、低分化组织及癌旁正常粘膜之间蛋白质组表达差异,寻找和鉴定癌组织与正常粘膜之间以及高、低分化癌组织之间差异表达蛋白,旨在探索应用蛋白质组学技术作为临床病理诊断的补充手段的可能性并提供理论依据。
采用双向凝胶电泳(2-DE)技术进行总蛋白分离,得到凝胶图谱采用PD-quest7.3软件进行合成、对比和差异分析,比较和寻找癌组织与正常组织、高分化与低分化组织之间表达差异点。将这些差异蛋白点切割、酶解后行肽指纹图分析及网上数据库鉴定。
结论表明本研究应用双向凝胶技术成功获得了国人大肠癌组织与癌旁正常粘膜组织的蛋白质表达图谱,经过软件分析发现大肠癌组织与正常粘膜组织、高分化癌组织与低分化癌组织之间均存在蛋白质组差异表达,在实验第二部分对这些差异蛋白进行了质谱分析鉴定。实验证明应用蛋白质组学技术来判断大肠肿瘤良、恶性和分化程度在理论上和方法上是可行的,目前的技术还需要不断向自动化、标准化和高通量方向改进。采用蛋白质组学研究方法和技术检测大肠肿瘤组织蛋白组差异表达,有望作为临床病理诊断的补充和依据,从而提高病理诊断的客观性和准确度。