【摘 要】
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目的:研究人类MM细胞系和MM患者BMSCs之间相互作用对VEGF和IL-6分泌的调控作用,分析VEGF和IL-6的相互作用在MM发病机制中的意义.方法:取14例MM患者和4例正常捐献者的骨髓,Fic
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目的:研究人类MM细胞系和MM患者BMSCs之间相互作用对VEGF和IL-6分泌的调控作用,分析VEGF和IL-6的相互作用在MM发病机制中的意义.方法:取14例MM患者和4例正常捐献者的骨髓,Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离出单个核细胞,接种于含20％胎牛血清的IMDM培养基中,培养得到MM-BMSCs和正常人-BMSCs(N-BMSCs),应用流式细胞仪测定其表型;在进行下面的实验前,BMSCs饥饿24小时(1％胎牛血清),以下实验均在少血清状态(1％胎牛血清)中进行;用ELISA方法检测体外培养的MM-BMSCs、N-BMSCs以及人类MM细胞系U266上清液中VEGF、IL-6的浓度;分别用重组人VEGF、IL-6刺激BMSCs,培养72小时,收集上清液,测定IL-6、VEGF的浓度,用抗VEGF单克隆抗体进行抑制实验;在BMSCs中分别加入抗VEGF单克隆抗体、抗IL-6单克隆抗体,培养72小时后收集上清液,检测IL-6、VEGF的浓度;用重组人IL-6刺激人类MM细胞系U266,培养72小时,收集上清液,测定VEGF的水平,用抗IL-6单克隆抗体进行抑制实验;在U266与BMSCs共同培养体系中分别加入抗VEGF单克隆抗体、抗IL-6单克隆抗体,培养72小时后收集上清液,检测IL-6和VEGF浓度.未加细胞因子的单独培养于含1％胎牛血清的培养基中的U266细胞或BMSCs上清液中IL-6或VEGF的浓度作为对照.结论:在MM中,骨髓瘤细胞和骨髓基质细胞之间的相互作用调节VEGF和IL-6的分泌,促进骨髓瘤细胞的生长和血管新生,在MM的发病机制中发挥重要作用,为针对骨髓微环境的靶位治疗提供了理论依据.
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