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白细胞介素13(interleukin-13)是一种重要的Th2型细胞因子,与其变异体(Arg130Gln,IL-13’)都与支气管哮喘的发生有密切关系。而且携带有变异型IL-13基因的个体呈现哮喘易感状态。为了研究野生型IL-13及其变异体对支气管哮喘信号转导途径的影响,本研究以野生型IL-13刺激的ASMC细胞和变异型IL-13刺激的ASMC细胞为研究模型,在众多的蛋白质组学策略中选择了双向电泳技术作为研究手段,通过对比两种蛋白刺激后对哮喘主要效应细胞的总蛋白表达差异,探讨野生型IL-13及其变异体对引发哮喘的机制的异同。从而为后续的深入研究打下基础。
本研究以空白ASMC细胞的双向电泳图谱为对照,对野生型及变异型IL-13刺激后的双向电泳图谱进行比较,共进行了3次重复实验,获得了较好的重复性和可比性。凝胶图像经PDQuest软件分析表明:野生型和变异型IL-13刺激组分别有563±21、594±14个蛋白质斑点可被检测;野生型与变异型IL-13刺激后的ASMC细胞图谱中有490±18斑点匹配。
通过研究野生型和变异型IL-13刺激后哮喘效应细胞的总蛋白表达差异,以求发现差异表达的信号分子。以后将辅以其他手段如免疫共沉淀等更为深入地研究这些信号分子之间的作用机制。