电针对大鼠急性脊髓损伤Caspase-3表达的影响

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目的:采用大鼠急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)模型,观察电针对ASCI后神经细胞凋亡相关蛋白Caspase-3表达及其变化规律的影响,进一步揭示电针治疗ASCI的作用机制。方法:健康雌性Wistar清洁级大鼠,体重220±10g,共220只大鼠(100只用于免疫组化石蜡切片,100只用于FQ-PCR,20只用于电镜)随机分为4组,每组11只:电针组,造模后给予电针治疗;药物组,造模后给予caspase-3抑制剂治疗;模型对照组,造模后不给予任何治疗;假手术组,只暴露脊髓,不损伤;各组再分为6h、1d、3d、7d、14d时间组,每个时间组5只用于免疫组化检测。所有动物被处死前都进行运动功能的评定,方法参照Basso,Beattie和Bresnahan(BBB)评分标准;HE染色观察脊髓组织形态学变化;免疫组化方法检测脊髓组织Caspase-3表达。数据处理运用SPSS 13.0进行统计学分析。结果:1.电针对ASCI大鼠行为学的影响:电针组治疗后BBB评分,有8例分值增高(72.73%),2例分值降低(18.18%),1例死亡(9.09%);而药物组治疗后BBB评分,有3例分值增高(33.33%),6例死亡(66.67%)。电针对大鼠脊髓损伤后运动功能影响优于药物组,动物死亡的危险性低于药物组。2.电针对ASCI大鼠脊髓病理改变的影响:电针和药物组与模型组相比,各时间点脊髓组织病变明显减轻。6h电针组:神经元形态较好,中央尼氏小体消失、边聚。6h药物组:神经元间隙变小,水肿轻。1d电针组:尼氏体边聚,神经元形态较好。1d药物组:神经元形态较好,中央尼氏小体消失、边聚。3d电针组:中央尼氏小体消失、边聚。3d药物组:神经元数量增多,胶质细胞减少。7d电针组:神经元坏死减少,中央尼氏小体消失、边聚。7d药物组:见神经元修复,胶质细胞增加。14d电针组:尼氏体聚集在核周围。14d药物组:可见神经元坏死少,形态好,胶质细胞数量减少。3.电针组对Caspase-3表达的影响:提示处理因素与时间因素对Caspase-3的检测结果均有影响,相同时间点不同处理组的组间差异体现为:在假手术组阳性细胞有表达。在模型组,伤后6h开始有表达,3d表达较高,7d、14d下降。在3d,药物组表达量低于模型组、模型组高于假手术组(P<0.05);在14d,电针组表达量低于模型组(P<0.05)。结论:1.电针能促进ASCI大鼠后肢运动功能的恢复。2.电针能减轻ASCI大鼠受损段脊髓病理形态学的改变。3.电针能明显抑制ASCI大鼠模型损伤段脊髓caspase-3表达,对ASCI有保护作用。
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