目的：筛选与TNF-α转化酶胞内区相互结合的蛋白，进一步探讨TNF-α转化酶胞内区的生物学功能。 方法：利用蛋白质相互作用原理，应用酵母双杂交系统对小鼠睾丸cDNA文库进行筛选。(1)通过PCR方法扩增编码TNF-α转化酶胞内区(Tumor necrosis factor-α converting enzyme cytoplasm domain,TACEc)的DNA片段，并克隆进入pGBKT7载体，从而构建“诱饵”质粒pGBKT7-TACEc；(2)将“诱饵”质粒pGBKT7-TACEc转化酵母菌AH109，然后将被转化的酵母菌分别涂布在SD/-Trp和SD/-Ade/-Trp/-His/-Leu于培养基平板上，以观察“诱饵”蛋白自我激活报告基因与否； (3)在SD/-Trp液体中培养16 h后，测AD<,600>值，观察“诱饵”蛋白有无酵母毒性作用；(4)将已被“诱饵”质粒转化的AH109与小鼠睾丸cDNA文库进行杂交，筛选阳性克隆，分离阳性克隆中的cDNA进行验证，并测序和Blast比对分析。 结果：获得的目的基因片段大小与预期结果相同；经酶切鉴定和序列分析证实成功构建了pGBKT7-TACEc重组质粒；转化酵母菌AH109的pGBKT7-TACEc“诱饵”质粒不会自我激活报告基因；同时也没有酵母毒性作用；对小鼠睾丸cDNA文库筛选得到4个准阳性克隆，其中1个Ran结合蛋白M(RanBPM)，1个分类连接蛋白3(sorting nexin 3)，2个未知功能蛋白基因。 结论：成功筛选出肿瘤坏死因子-α转化酶胞内区相互作用蛋白，为进一步研究肿瘤坏死因子-α转化酶胞内区作用提供了新线索。