江苏省核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的抗药性监测及对菌核病的防治研究

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油菜菌核病是一种世界性植物病害,严重影响油菜的产量和品质。应用杀菌剂是防治油菜菌核病的主要手段。20世纪80年代以来,多菌灵是我国防治油菜菌核病的主要杀菌剂。由于油菜菌核病菌对多菌灵出现了抗药性,二甲酰亚胺类杀菌剂如扑海因、速克灵、乙烯菌核利、菌核净等在本世纪开始用于油菜菌核病防治。针对江苏省防治油菜菌核病的用药情况,本文监测了油菜菌核病菌对多菌灵、菌核净的抗药性,并研究比较了抗性菌株和敏感菌株的菌丝生长量、产菌核能力、致病力等生物学性状。结果表明抗多菌灵的油菜菌核病菌在自然界已经形成优势群体,导致多菌灵失去使用价值;通过油菜菌核病菌对菌核净的抗药性监测,首次发现江苏已经出现抗药性菌株,存在菌核净抗性风险;筛选出对菌核病菌具有极高抗菌活性的新型杀菌剂啶酰菌胺,并建立了油菜菌核病菌对该药剂的敏感性基线。2006~2008年从江苏省采集分离1786个油菜菌核病菌菌株,以5μg/mL和100μg/mL为区分剂量,监测油菜菌核病菌对多菌灵的抗药性。监测结果表明其对多菌灵的抗性频率为29.5%。不同地区抗性频率不同,抗性范围为3.1%~54.9%。抗性菌株和敏感菌株在菌丝生长、产菌核能力和致病力方面没有显著性差异,说明田间抗性菌株和敏感菌株在田间具有相似的寄主适合度。测定2006~2008年分离的1786个菌株对菌核净的敏感性。其中大部分对菌核净是敏感的,只有2007年从盐城地区和常州地区采集的5个菌株能够在5μg/mL正常生长,抗性倍数是敏感菌株的10倍。通过药剂驯化方法从10个出发菌株获得25个抗性突变体,抗性倍数为198~484,这些突变体的抗性水平可以认为是极高抗的菌株。因此推断油菜菌核病对菌核净的抗药性机制至少应该有两类:一类是田间发现的低抗菌株,另一类是实验室诱导的极高抗菌株。菌核净对其它的二甲酰亚胺类杀菌剂如扑海因、速克灵等有明显的正交互抗药性。田间抗性菌株和实验室诱导抗性菌株,与亲本菌株比较,菌丝生长减慢,菌核干重下降,致病力没有明显差异。所测定的实验室诱导菌株在含有2%、4%、6%、8%(w/v) NaCl的PDA培养基上的生长速率都比亲本菌株慢,田间抗性菌株和敏感菌株生长速率则没有显著差异。120个核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)菌株分别采自江苏南通、盐城、泰州、扬州、宿迁、镇江、苏州等地。采用菌丝生长速率法在PDA培养基上测定各菌株对啶酰菌胺的敏感性,测定结果表明,自然界野生敏感菌株对啶酰菌胺的敏感性存在差异,120个核盘菌对啶酰菌胺的EC50值变化范围是0.028~0.408μg/mL,平均EC50为0.170±0.085μg/mL,最低抑制浓度(MIC)≤20μg/mL。表明该杀菌剂对核盘菌的菌丝生长有较强的的抑制活性。通过测定啶酰菌胺、多菌灵和菌核净的敏感性,结果表明:这三类药剂没有交互抗药性。
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