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目的鲍曼不动杆菌是医院感染的常见菌,尤其碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌已成为临床面临的严重挑战,替加环素是用于治疗鲍曼不动杆菌感染的主要药物之一,根据CHINET中国临床菌株历年统计情况,鲍曼不动杆菌对替加环素的耐药率逐渐增加,而目前临床上主要通过K-B法及MIC法检测鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感性,但替加环素体外药敏试验操作规程专家共识指出,对鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌及阴沟肠杆菌,琼脂稀释法和MTS与肉汤稀释法符合性较好,纸片扩散法和VITEK2 GN16的检测结果与肉汤稀释法的一致性较低。MALDI-TOF MS是实验室新兴的一种检测技术,目前已广泛应用于细菌、真菌等病原体的快速检测,已有文献报道,利用该技术检测碳青霉烯酶的产生,来预测对碳青霉烯类药物的敏感性,得到较好结果。本课题利用MALDI-TOF MS技术建立了自建库和算法分析快速检测替加环素对鲍曼不动杆菌敏感性的新方法,以期快速给出药敏结果以指导临床用药,同时建立树状图进行同源性分析,用于院感爆发的流行监测,为医院感染防控提供一种快速检测方法。方法利用MALDI-TOF MS技术鉴定107株鲍曼不动杆菌,K-B法、肉汤稀释法对107株鲍曼不动杆菌进行药物敏感性分析,筛选出替加环素耐药和敏感的鲍曼不动杆菌,利用筛选出的鲍曼不动杆菌建立替加环素耐药和敏感鲍曼不动杆菌数据库并进行算法分析,最后进行自建库及算法模型的验证。方法学评价指标及判断标准:根据分类一致率、重大误差及非常重大误差三个指标评价数据库效果,分类一致率(CA)定义为按照折点标准,自建库的分类结果与参考方法的结果一致的百分比,小误差(mE)定义为菌株在同一折点判断标准下,被评估方法将中介判定为敏感或耐药,重大误差(ME)定义为在同一判断标准下,被评估方法将敏感判断为耐药,非常重大误差(VME)定义为在同一判断标准下,被评估方法将耐药判断为敏感。上述指标要求:CA≥90%,mE≤10%,ME≤3%,VME≤1.5%。结果MALDI-TOF MS鉴定结果显示107株细菌为103株鲍曼不动杆菌、3株琼氏不动杆菌和1株医院不动杆菌;检测103株鲍曼不动杆菌对替加环素敏感性,K-B法结果显示敏感的有10株、耐药有54株、中介有39株。对K-B法结果为非敏感的93株鲍曼不动杆菌,进行微量肉汤稀释法复核,结果显示为敏感的有29株、耐药有37株、中介有27株,两种方法的一致率为55.34%(57/103),ME0%,VME0%,mE62.96%。GA、SNN、QC三种算法模型内部验证特异性及敏感性均高于85%,但是外部验证结果大部分均在60%以下,选择差异性峰值人工建立算法模型,结果显示各种模型的内部验证特异性及敏感性均高于75%,但外部验证敏感株及耐药株准确性均低于50%。自建库对替加环素耐药鲍曼不动杆菌的正确检出率为87.4%,替加环素敏感菌株的正确检出率为77.5%,CA为82.4%,ME22.5%,VME12.9%,同源性分析结果76株鲍曼不动杆菌明显分为2大簇4个分型。每种型别分别为10、16、29和21株。替加环素耐药鲍曼不动杆菌的比例分别为0%(0/10)、50%(8/16)、48.28%(14/29)、71.42%(15/21)。其中II型主要存在于急诊ICU及重症监护室,分别为8株和3株。结论MALDI-TOF MS可快速鉴别鲍曼不动杆菌、琼氏不动杆菌及医院不动杆菌,同时可快速预测鲍曼不动杆菌对替加环素的耐药性及同源性分析。