【摘 要】
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目的本实验运用不同浓度胰酶消化法分别消化正常妊娠8~12周的人工流产绒毛和蜕膜组织,分离得到纯度较高的细胞滋养层细胞(CTB)和绒毛外滋养层细胞(EVT);利用高通量的基因芯片
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目的本实验运用不同浓度胰酶消化法分别消化正常妊娠8~12周的人工流产绒毛和蜕膜组织,分离得到纯度较高的细胞滋养层细胞(CTB)和绒毛外滋养层细胞(EVT);利用高通量的基因芯片技术制备CTB和EVT基因表达谱芯片,对比分析获取差异表达基因。同时,对CTB的标志物HAI-1基因及其表达产物在绒毛组织中的表达规律进行了初步研究。为探讨胚胎早期发育过程中滋养层细胞侵袭的基因网络调控机制提供了实验基础和理论依据。方法1、收集正常妊娠第8~12周绒毛和蜕膜组织,胰酶消化法分离CTB和EVT,分析细胞纯度和活性。2、提取CTB和EVT的总RNA,检测RNA纯度和完整性。3、RNA送公司制备基因芯片,并提取基因表达谱数据。4、分析数据,获取差异表达基因。5、选取两个差异表达基因MMP-9和TIMP-1,RT-PCR验证芯片结果可靠性。6、分析差异表达基因的生物学功能,并对基因进行分类检索。7、RT-PCR和免疫组织化学法检测CTB标志物HAI-1基因和蛋白
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