乳酸菌发酵清瘟败毒散提取液的制备及其在断奶仔猪上的应用

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本研究旨在以两种乳酸菌(植物乳杆菌和屎肠球菌)对清瘟败毒散提取液进行发酵,探索其对乳酸菌生长的影响,并对发酵工艺进行优化,以及用发酵罐扩大试验验证,然后将发酵制剂应用于断奶仔猪,观察其对断奶仔猪生产性能的影响。具体试验内容如下:(1)清瘟败毒散提取液对乳酸菌生长的影响及发酵工艺优化。首先在培养液中添加0、20%、40%、60%、80%、100%(体积百分比)的清瘟败毒散提取液,对乳酸菌进行培养,研究其对乳酸菌生长的影响。结果显示,随药物浓度增加乳酸菌活菌量先升后降,表明清瘟败毒散提取液对乳酸菌生长有一定的促进作用,其适宜添加量为40%。其次,通过L9(34)三因素三水平正交试验对培养基中红糖、豆粕、酵母浸粉的添加量进行优化,结果显示酵母浸粉对乳酸菌生长的影响最大,豆粕次之,红糖最小;最优培养基为:每升培养液中,红糖20g、豆粕5g,酵母浸粉4g,乙酸钠3g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.1g、硫酸锰0.02g、吐温80 1m L、p H7.0,乳酸菌活菌量达到7.6×108CFU/m L,是优化前的1.38倍。然后对初始p H、接种量、发酵温度、发酵时间等发酵条件进行优化,确定了最佳发酵条件为:初始p H7.0、接种量2.5%、发酵温度34℃、发酵时间36h。培养基和发酵条件优化后,活菌含量为1.22×109CFU/m L,活菌含量是优化前的2.18倍。(2)发酵罐扩大培养和优化试验。三角瓶优化发酵工艺通过用发酵罐扩大试验,结果显示乳酸菌含量升高,是三角瓶培养的1.32倍,说明发酵罐为乳酸菌提供了更适宜的生长条件,更利于乳酸菌的生长;添加一定量的Ca CO3能促进乳酸菌的生长,最适添加量为1.5%;一定范围内提高发酵罐转速可以促进乳酸菌的生长,适宜转速为70rpm。(3)发酵清瘟败毒散提取液在断奶仔猪上的应用。采用单因素试验设计,饮水给药,选择360头体重接近的28(±3)d三元杂交断奶仔猪,随机分为6个处理,设对照组、乳酸菌口服液组(200倍稀释)、未发酵清瘟败毒散提取液组(200倍稀释)、3个发酵清瘟败毒散提取液组(A组400倍稀释、B组200倍稀释、C组100倍稀释),每个处理3个重复,每个重复20头猪。试验期28d,计算采食量、日增重、料重比、腹泻率和淘汰率。结果显示,发酵清瘟败毒散提取液各组与对照组相比,均能显著提高平均日采食量、日增重,降低料重比、腹泻率和淘汰率;B组、C组效果明显好于未发酵组和乳酸菌口服液组。其中,B组与对照组、乳酸菌口服液组、未发酵组相比,平均日采食量分别提高了13.2%(P<0.05)、11.9%(P<0.05)、2.5%(P<0.05),平均日增重分别提高了29.4%(P<0.05)、24.9%(P<0.05)、7.1%(P<0.05),料重比分别降低了12.6%(P<0.05)、10.4%(P<0.05)、4.6%(P<0.05),腹泻率分别降低了72.8%(P<0.05)、65.3%(P<0.05)、40.6%(P<0.05);B组与对照组、乳酸菌口服液组相比,淘汰率分别降低了83.5%(P<0.05)、80.2%(P<0.05)。研究表明,清瘟败毒散提取液发酵后,用于断奶仔猪保健,药效提高,最适添加量为200倍稀释饮水。
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