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目的：结直肠癌(CRC)是最常见的消化道肿瘤之一,由于早期诊断率低,术后易复发或转移,其仍是一种具有高侵袭性、高病死率的恶性肿瘤。结直肠癌的早期诊断及复发或转移的监测是目前亟待解决的问题,寻找方便有效的标志物显得尤为重要。本研究的目的就是探讨结直肠癌患者外周血中抗survivin抗体及survivin mRNA的表达情况及其临床意义,为结直肠癌的诊治提供更多的生物学标志物。方法：选择CRC患者116例,依据所接受治疗手段,分为根治手术组、姑息手术组、姑息化疗组。对照组为30例健康体检者。根治手术组和姑息手术组分别于手术前1天、术后第4周末清晨空腹采集外周血5ml,其中根治手术组每3个月随访一次,抽外周血5ml；姑息化疗组于化疗前及化疗2周期后采集外周血5ml；对照组清晨空腹采集外周血5ml。所采集血液标本中,其中2ml使用无抗凝剂的真空管采集,以3000r/min,离心10min,取上清液,冻存于-20℃冰箱,用于检测抗survivin抗体；剩余3ml使用含有乙二胺四乙酸抗凝剂的真空管采集,采集后室温静置半小时,然后提取总RNA,用于检测survivin mRNA。应用双抗原夹心酶联免疫吸附法测定血清中抗survivin抗体的水平。向预先包被人存活素抗体的酶标孔中加入标准品、待测样本和辣根过氧化物酶标记的存活素抗体,经过温育和洗涤,去除未结合的组分,然后依次加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成为最终的黄色。颜色的深浅与样品中抗survivin抗体的浓度呈正相关。通过测定标准品得到标准曲线方程,依据标准方程计算抗survivin抗体浓度。应用半定量RT-PCR法测定外周血中survivin mRNA相对表达水平。首先提取外周血中总RNA,检测其纯度和完整性后,进行反转录。反应体系包括5X Buffer2μl, RT Enzyme Mix I0.5μl, Oligo dT Primer(50M)0.5μl, Random6mers(100M)0.5μl, Total RNA500ng,, RNase Free dH2O补至10μl。反转录条件为37℃,15min,85℃,5s。选取β-actin作内参基因,应用Primer Premier5.0软件设计引物。Survivin mRNA上下游引物分别为5’-GTCCCTGGCTCCTCTACTG-3’5’-GACGCTTCCTATCACTCTATTC-3’,产物大小为174bp; β-actin上下游引物分别为5’-AGAGCCTCGCCTTTGCCGAT-3’,5’-TGCCAGATTTTCTCCATGTCGT-3’,产物大小为313bp。25μlPCR反应体系包含Premix Ex Taq(2×)12.5μl,上游引物0.5μl,下游引物0.5μl,DNA模板2μl,灭菌蒸馏水9.5μl。经过预变性95℃,30s,34个循环(变性95℃,5s,退火60℃,30s,延伸72℃,50s),终延伸72℃,2min,其中survivin循环数为34,退火温度60℃,β-actin循环数为28,退火温度62℃。所得产物进行2.5%琼脂糖电泳鉴定,并应用培清凝胶成像分析系统,分别测定β-actin和survivin条带的光密度值,并计算survivin的表达系数,即survivin的光密度值与β-actin的光密度值之比。应用SPSS18.0软件包进行统计学分析,计量资料采用t检验或方差分析,计数资料采用卡方检验,P<0.05为差异有显著性。结果：1.CRC患者与健康者外周血中抗survivin抗体阳性率分别为40.5%和0,survivin mRNA阳性率分别为76.7%和0,均有显著差异(P=0.000)。2.CRC患者外周血中抗survivin抗体及Survivin mRNA的表达与患者年龄、性别、肿瘤类型、组织学分型无关,而与分期、肿瘤大小及淋巴结是否转移显著相关。抗survivin抗体表达水平及survivin mRNA阳性率随着肿瘤分期的增高而增高；肿瘤直径>5cm者二者表达水平较肿瘤直径≤5cm者高,差异具有显著性(P=0.045,P=0.003)；有淋巴结转移者抗survivin抗体水平及survivin mRNA阳性率较无淋巴结转移者显著增高(P=0.040,P=0.000)。3.74例CRC患者行根治性手术,术后血清中抗survivin抗体水平及survivin mRNA表达较术前明显降低(P=0.005,P=0.004)；随访过程中出现复发或者转移共13例,复发或转移患者外周血中二者表达水平均较前显著升高(P=0.024,P=0.048)。此外,复发或转移者根治术后二者表达水平显著高于无复发或转移者(P=0.001,P=0.004)。14例患者行姑息手术,手术前后抗survivin抗体和survivin mRNA表达水平无显著差异(P=0.709,P=0.669)。4.在行姑息性化疗的患者中,有效组抗survivin抗体和survivin mRNA表达水平化疗后较化疗前明显降低(P=0.043,P=0.032)；无效组抗survivin抗体水平化疗前后变化无显著性(P=0.135),而survivin mRNA表达水平化疗后较化疗前显著升高(P=0.039)；二者水平均低者较高者对化疗更敏感(P=0.001,P=0.006)。结论：1.抗survivin抗体和survivin mRNA在CRC患者外周血中表达较高,可能是监测结直肠癌的发病指标之一。2.抗survivin抗体和survivin mRNA与肿瘤负荷、肿瘤分期及淋巴结转移具有相关性,或可作为预后判定的指标之一。3.外周血中Survivin可能是监测肿瘤微转移及判断肿瘤预后的指标之一。在根治术后检测抗survivin抗体和survivin mRNA水平可对发生转移或复发进行预测：在随访过程中定期检测有抗survivin抗体和survivin mRNA水平,可监测是否发生转移或复发。4.姑息化疗前抗survivin抗体和survivin mRNA表达水平或可以作为姑息化疗敏感性筛查的指标之一；姑息化疗前后二者水平变化,可以作为化疗疗效评定指标之一。