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目的:益母草碱是中药益母草的主要有效成分之一,前期研究表明其具有一定的心脏保护作用。本研究通过结扎大鼠冠状动脉左前降支制备急性心肌梗死和长期梗死致心衰的动物病理模型,观察益母草碱对急性心肌梗死造成的心肌细胞损害和心功能的影响,并从心肌细胞凋亡以及细胞外基质的角度探讨其改善梗死后心衰及心室重构的作用机制。 方法:1.采用结扎大鼠冠状动脉左前降支的方法制备急性心肌梗死模型,冠脉结扎前一周各组动物按相应剂量腹腔注射药物,术后继续腹腔注射给药2天后(共给药10天),TTC染色法检测并计算心肌梗死面积,测定大鼠血浆中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的含量,检测血浆中SOD活性及MDA水平。 2.采用长期心肌梗死致心衰大鼠模型,灌胃给予药物干预6周后,行心脏超声学检查检测心功能改变,观察大鼠体重变化并计算全心湿重、肺重与体重比值,ELISA方法测定血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和醛固酮(ALD)水平,并通过RT-PCR和Western blot的方法观察益母草碱对凋亡相关因子Bax、Bcl-2及基质金属蛋白酶MMP-2的mRNA表达和蛋白的影响。 结果:1.(1)与假手术组比较,心梗模型组的心肌梗死面积显著增加,3个给药组处理后左心室梗死面积不同程度降低,具有统计学意义(P<0.05)。(2)与假手术组比较,心梗模型组血浆中LDH及CK的含量均显著升高(P<0.01);与心梗模型组比较,3个给药组均能明显降低心梗大鼠血浆中LDH、CK的含量,减轻LDH和CK的细胞漏出率。(3)与假手术组比较,心梗模型组血浆中CuZn-SOD活力的变化没有统计学意义,T-SOD活力下降明显(P<0.05),而血浆中MDA含量在心肌缺血后显著性升高(P<0.01);3个给药组处理后均能明显升高血浆中T-SOD的活性,同时不同程度降低血浆中MDA水平(P<0.05),CuZn-SOD活力仍然没有明显变化。 2.(1)与假手术组比较,心力衰竭模型组EF、FS、LVAW、LVPW等指标显著降低(P<0.05),表明冠脉结扎6周后大鼠左心室收缩功能明显降低而且左室结构发生改变,3个给药组治疗后并没有明显改善其心脏形态和功能。(2)与假手术组比较,心衰模型组大鼠体重(BW)无明显变化,全心湿重(HW)、肺重(Lung Weight)、心重指数(HW/BW)、肺重指数(Lung Weight/BW)显著增加(P<0.05),Leo30mg/kg和Cap阳性药组的HW、Lung Weight、Lung Weight/BW较心衰模型组明显降低(P<0.05),表明益母草碱高剂量能明显减轻心脏肥大和肺淤血,并降低肺重指数。(3)与假手术组比较,心肌缺血后心衰模型组血浆中AngⅡ和ALD含量明显升高;3个给药组处理后血浆中AngⅡ水平和ALD水平较模型组显著降低(P<0.05)。(4) Leo30mg/kg能增加梗死区Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,并下调心室重构相关的MMP-2蛋白表达,与心衰模型组比较有统计学意义。Leo30mg/kg对Bax、Bcl-2 mRNA的表达与其对蛋白表达的影响趋势大致相同。Leo30mg/kg还可抑制MMP-2在心脏梗死组织中的表达,与心衰模型组相比有统计学意义。 结论:1.益母草碱通过减小心肌梗死面积,降低心肌酶谱活性从而达到保护心肌细胞膜的完整性,对急性缺血造成的心肌损伤有良好的预防性保护作用,其作用机制与提高心肌组织抗氧化能力有关。2.益母草碱通过降低神经内分泌激素释放以阻断AngⅡ和ALD激活的下游相关途径,从而预防或减缓急性心肌梗死后的心室重构。同时益母草碱还通过降低心重、肺重及肺重指数以减轻心衰大鼠的心脏肥大和肺淤血,对慢性心力衰竭有较好的治疗作用,其机制可能是通过下调Bax蛋白表达、上调Bcl-2蛋白表达而起到抗心肌细胞凋亡作用,抑制MMP-2蛋白表达以改善细胞外基质病变、减少心肌纤维化、改善梗死后心室重构,从而改善心力衰竭。