表皮生长因子(EGF)对体外培养食管癌细胞增殖及迁徙能力影响的初步研究

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[背景和目的] 表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)通过其细胞表面的受体即表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)介导发挥多种生物学效应。目前关于EGF生物学功能的研究已积累了大量的资料。研究表明:EGF不但参与正常细胞的增殖和分化,而且还参与肿瘤的形成与演进。但同时还有文献报道EGF能够抑制一些EGFR过度表达的肿瘤细胞生长,甚至诱导肿瘤细胞凋亡。国内外对EGF作用食管癌细胞后增殖效应的报道不一。近年来还发现EGF具有趋化性,能够诱导细胞迁徙。EGF能否诱导食管癌细胞发生迁徙,参与食管癌的浸润和转移,国内外均未有相关文献报道。因此,本研究采用不同浓度EGF作用食管癌细胞系EC109和EC-1后,通过对细胞形态观察、MTT检测细胞增殖活力、单克隆扩散实验和划痕损伤实验检测细胞的浸润迁徙能力,激光共聚焦显微镜观察细胞骨架的组分——微丝的变化和Western-blot检测EGFR的表达水平变化,观察不同浓度的EGF作用食管癌细胞后增殖及浸润能力等生物学特性的变化,以及从细胞和分子水平上对其机制进行初步探讨,为了解EGF在食管癌的发生发展中的作用提供一个新的思路。 [材料和方法] 1.不同浓度EGF作用培养的食管癌细胞EC109、EC-1后,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化。 2.MTT法检测不同浓度EGF作用食管癌细胞EC109、EC-1后细胞增殖活性变化。 3.AO染色和流式细胞术检测晚期细胞凋亡。 4.单克隆扩散实验(Scattering Assays)、划痕损伤实验(Wound-healing Assays)检测细胞迁徙浸润能力变化。
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