论文部分内容阅读
软组织的急慢性损伤是导致慢性疼痛和功能障碍最常见的原因,给家庭和社会造成巨大的负担。炎症是导致疼痛的主要原因,而软组织自身的修复障碍会导致炎症反复发作,从而造成慢性疼痛和功能障碍。目前的治疗方法仍以保守治疗为主,包括:口服药物,制动及理疗等,疗效具有一定的不确切性,部分患者需要通过手术治疗的方式解除痛苦,然而手术治疗花费巨大,效果也并不确切。理想的治疗方法是创伤小,在改善疼痛的同时可使损伤的软组织获得修复。 近年来,再生疗法在慢性软组织损伤中的应用受到越来越多的重视,包括自体血疗法和干细胞治疗等,而自体血疗法主要包括:富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)疗法和欧凯疗法。PRP是通过离心静脉全血后获得的血小板浓聚物,研究显示血小板激活后能释放多种生长因子,如:转化生长因子-β(TGF-β)、成纤维生长因子(FGF)、结缔组织生长因子(CTGF)等,这些生长因子可促进软组织的修复。而欧凯疗法是将血液注入含有直径为2.5mm的医用等级玻璃球的试管内,然后在37℃,5%CO2的条件下孵育24小时,再通过离心得到自体活化血清(autologous conditioned serum,ACS),将自体活化血清注入患者受损部位,研究显示ACS中含有大量的抗炎因子,通过孵育后抗炎因子呈几何指数增长,可显著促进组织的修复,目前在部分欧美国家已应用于临床。 肱骨外上髁炎俗称网球肘,是临床最常见的软组织损伤引起的疼痛性疾病之一,其病理改变是上肢伸肌总腱附着点及其周围的炎症,普通人群的发病率约1~3%。与常见的软组织损伤一样,保守治疗是其最常见的治疗方式,临床上保守治疗无效的患者多数可以通过在病变肌腱周围注射糖皮质激素获得改善,但部分顽固性肱骨外上髁炎患者在经过上述治疗后仍然多次复发或疗效不持久,有些患者因为接受多次糖皮质激素注射引起肌腱萎缩和局部结构改变,反而加重损伤和疼痛,甚至有患者因此丧失劳动力。本研究第一部分通过注射PRP至肱骨外上髁病变部位,观察PRP对顽固性肱骨外上髁炎的疗效,以期为顽固性肱骨外上髁炎的治疗提供有效持久的方案。 欧凯疗法主要是通过ACS中高浓度的抗炎因子来发挥临床作用,目前主要用于骨关节炎的治疗。相关的研究表明,ACS中的抗炎因子升高的同时,促炎因子水平变化不大,另外目前孵育ACS的方法比较单一,相关技术的研究也鲜有报道,因此本研究第二部分我们通过对健康成人的自体静脉全血的孵育,测试其中抗炎因子和促炎因子的水平,并观察不同的理化因素对ACS孵育的影响,为ACS的临床应用提供依据的同时寻求孵育ACS的新技术。 目的: 探讨富血小板血浆对顽固性肱骨外上髁炎的临床疗效;观察不同理化因素对自体静脉全血中细胞因子活化的影响,以寻求自体活化血清孵育的新技术。 方法: 第一部分:2014年9月~2016.6,采用超声引导下注射自身PRP治疗顽固性肱骨外上髁炎患者15例,其中男性7名,女性8名,年龄35-67岁,平均年龄(54.53.41)岁,其中左侧2例,右侧13例,利用二次离心法离心患自身静脉全血得到PRP,所有患者每周行1次PRP注射治疗,共计3次,观察首次治疗后0~12个月患者疼痛和肘关节功能的改善情况; 第二部分:收集8名健康志愿者全血各22ml,取2ml行全血细胞计数,余20ml分为四组:对照组,空白孵育组,无菌玻璃球孵育组以及碳纳米管孵育组。对照组即全血不孵育的情况下以1000×g速度离心10min,取上清液。而空白孵育组,无菌玻璃球孵育组以及碳纳米管孵育组均在37℃,5%CO2的无菌条件下孵育24h,随后以1000×g速度离心10min,取上清。ELISA检测上清液中的IL-1Ra和IL-1β的浓度,并计算IL-1Ra与IL-1β的比值。 结果: 第一部分:患者在首次治疗后开始随访,随访时间12个月,治疗后1个月开始患者疼痛(VAS评分)较治疗前显著改善,治疗后3个月VAS评分,并可持续至12个月,肘关节功能(MAYO肘关节功能评分)在治疗后1个月也得到显著改善,并且疗效持续至12个月。 第二部分:与对照组相比,空白孵育组、无菌玻璃球孵育组以及碳纳米管孵育组IL-1Ra浓度均显著增加;与空白孵育组相比,无菌玻璃球孵育组以及碳纳米管孵育组IL-1Ra含量升高更显著;碳纳米管孵育组与无菌玻璃球孵育组相比,IL-1Ra浓度无显著差异; 与对照组相比,空白孵育组、无菌玻璃球孵育组以及碳纳米管孵育组IL-1β浓度均显著升高;与空白孵育组相比,无菌玻璃球孵育组IL-1β浓度升高更显著,而碳纳米管孵育组无显著差异;与碳纳米管孵育组相比,无菌玻璃球孵育组IL-1β浓度升高更显著; 与对照组相比,空白孵育组、无菌玻璃球孵育组以及碳纳米管孵育组IL-1Ra/IL-1β比值均显著降低;与空白孵育组相比,碳纳米管孵育组IL-1Ra/IL-1β比值升高更显著,而无菌玻璃球孵育组无显著差异;与无菌玻璃球孵育组相比,碳纳米管孵育组IL-1Ra/IL-1β比值升高,差异具有统计学意义。 结论: 第一部分:超声可识别肱骨外上髁炎患者的病变情况,同时在超声引导下可将PRP精确注射至病变部位。PRP疗法可有效缓解顽固性肱骨外上髁炎患者的疼痛,改善患者的肘关节功能障碍,并且疗效持久; 第二部分:不同理化因素条件孵育对自体血细胞因子活化存在影响。经过孵育后,ACS中的促炎因子和抗炎因子均显著升高,碳纳米管和无菌玻璃球可促进ACS中IL-1Ra的升高,但碳纳米管孵育组的IL-1Ra/IL-1β比值升高最为显著,因此加入碳纳米管可能可以成为ACS孵育更有效的方法,另外如何寻找更优的ACS孵育方法以及其临床效应有待进一步探讨。