红景天联合布地奈德对哮喘小鼠气道炎症和气道重塑影响的研究

来源 :泸州医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zisanjie
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目的:采用卵清蛋白(VOA)致敏及激发复制小鼠哮喘模型,观察红景天联合糖皮质激素对哮喘小鼠肺组织中白介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)、转化生长因子β1(TGF-β1)、一氧化氮(NO)、总抗氧化能力(T-AOC)的表达和气道胶原沉积面积的影响,探讨红景天联合糖皮质激素对哮喘小鼠气道炎症、气道重塑和氧化应激的调控作用及机制。方法:56只C57bL/6小鼠随机分成对照组(A组)、哮喘组(B组)、布地奈德组(C组)、红景天低剂量组(D组)、红景天高剂量组(E组)、低剂量红景天联合布地奈德组(F组)、高剂量红景天联合布地奈德组(G组),每组8只。采用VOA致敏及激发复制哮喘模型,雾化吸入布地奈德和低、高剂量红景天灌胃干预。观察小鼠临床表现特点,刘氏染色法分类计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞数,双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中IL-4、IFN-γ和TGF-β1的浓度,HE染色和masson染色观察气道炎症及气道胶原沉积面积,免疫组化法检测肺组织中TGF-β1、IL-4和IFN-γ的表达,总NO检测试剂盒检测肺组织中NO活性,T-AOC检测试剂盒(ABTS)检测肺组织中T-AOC含量。结果:1. BALF细胞总数及其分类计数的结果:B组BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞计数较A组明显升高(P<0.05);C组、D组、E组、F组和G组BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞计数较B组明显下降,且高剂量组与低剂量组相比较降低明显,差异具有统计学意义(P均<0.05),G组细胞总数及嗜酸性粒细胞计数降低最为显著。2. BALF中IL-4、TGF-β1、IFN-γ结果:B组IL-4、TGF-β1(259.16±4.27,160.49±6.41)的水平较A组(27.46±5.82,59.32±7.39)明显增高(P<0.05),而B组IFN-γ的水平(72.53±9.43)较A组(187.94±10.54)显著降低(P<0.05);经红景天及布地奈德干预后,BALF中IL-4、TGF-β1在C组(84.14±5.21,97.86±5.37)、D组(147.53±3.59,113.13±6.28)、E组(135.36±3.34,104.27±5.14)、F组(78.38±6.04,91.32±7.03)和G组(73.14±2.93,85.24±7.08)中的水平较B组明显降低,G组降低最明显,差异具有统计学意义(P均<0.05),而IFN-γ在C组(122.58±12.61)、D组(92.7±11.39)、E组(103.4±9.72)、F组(126.37±10.39)和G组(130.29±8.22)中的水平较B组则明显升高,G组升高最明显,差异具有统计学意义(P均<0.05)。3.(1)HE染色:B组可见大量炎症细胞浸润,A组无明显炎症改变,经红景天及布地奈德干预后,C组、D组、E组、F组和G组炎症细胞浸润明显减少,以G组减少最明显;(2)Masson染色:B组可见大量胶原沉积,Wcol/Pbm(32.8±5.1)较A组(5.4±1.3)明显增高(P<0.05),经红景天及布地奈德干预后,C组(10.7±2.5)、D组(11.9±2.6)、E组(11.0±2.4)、F组(9.9±3.2)和G组(8.7±1.9)中Wcol/Pbm较B组明显降低,以G组减轻最为明显,差异具有统计学意义(P均<0.05)。4.支气管肺组织免疫组化IL-4、TGF-β1、IFN-γ的表达: B组IL-4、TGF-β1(0.335±0.017,0.417±0.008)的水平较A组(0.039±0.006,0.168±0.003)明显增高(P<0.05),而B组IFN-γ的水平(0.093±0.009)较A组(0.314±0.027)显著降低(P<0.05);经红景天及布地奈德干预后,BALF中IL-4、TGF-β1在C组(0.130±0.003,0.238±0.004)、D组(0.156±0.009,0.298±0.017)、E组(0.143±0.005,0.271±0.013)、F组(0.126±0.013,0.227±0.015)和G组(0.114±0.002,0.213±0.009)中的水平较B组明显降低(P均<0.05),而IFN-γ在C组(0.276±0.005)、D组(0.238±0.012)、E组(0.249±0.004)、F组(0.282±0.014)和G组(0.288±0.003)的水平较B组明显升高,差异具有统计学意义(P均<0.05)。5.肺组织中NO和T-AOC的含量:与A组(0.328±0.124,1.030±0.021)相比,B组(1.235±0.084,0.475±0.023)肺组织中NO的含量显著升高,T-AOC的含量明显降低(P<0.05);经干预后与B组相比,C组(0.764±0.007,0.750±0.106)、D组(0.892±0.156,0.502±0.202)、E组(0.813±0.005,0.580±0.219)、F组(0.715±0.016,0.780±0.061)和G组(0.669±0.172,0.803±0.110)肺组织中NO的表达明显降低,T-AOC明显升高,差异具有统计学意义(P均<0.05)。结论:1.OVA致敏及激发可成功构建小鼠哮喘模型。2.红景天和布地奈德干预治疗均可抑制哮喘小鼠肺组织中IL-4、TGF-β1、NO的水平并增加IFN-γ、T-AOC的表达,但以布地奈德作用更明显。3.红景天能够抑制气道炎症和气道重塑,具有抗氧化作用,且存在剂量依赖关系。4.红景天和布地奈德联合用药具有协同作用,其机制可能是通过调节IL-4/IFN-γ、NO/T-AOC失衡,抑制TGF-β1的表达有关。
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