目的：子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)在美国等西方国家已占女性生殖器官恶性肿瘤之首。随着生活水平的提高、人口的老龄化、激素替代治疗的广泛应用,子宫内膜癌的发病率逐年升高。虽然随着人们保健意识加强和宫腔镜技术的推广,约70％内膜癌患者在肿瘤Ⅰ期就被确诊。即使这样还会有30％高危人群(如肥胖、糖尿病、乳腺癌等)仍需要可靠的血清标志物作为辅助检查,无创的血清标志物检查不仅能提高EC的检出率,还有助于疗效观察和复发监测。目前子宫内膜癌尚没有理想的标志物。子宫内膜癌的5年生存率近30年来提高并不明显,特别是II型子宫内膜癌,确诊时多数已经伴有子宫外转移,5年存活率显著降低,预后很差。因此寻找有效的标志物及提高Ⅱ型子宫内膜癌患者的救治效果成为临床上攻克子宫内膜癌的难点。Dickkopf-1(DKKl)是Glinka等于1998年在两栖动物非州蟾蜍胚胎细胞中首次发现的。DKK1通过对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)经典信号传导途径以及Wnt非经典转导途径的调控细胞的分化、增殖、极性、迁移和癌变等生物学特性,在肿瘤的发生和胚胎的发育方面发挥重要作用。DKK1在不同人类肿瘤中的有的表现抑癌基因有的表现为促癌基因,其具体功能目前还没有达成肯定的共识。DKK1分泌型分子的特性和在正常人体组织中广泛低表达的特点,促使其可能成为一个新的肿瘤血清学诊断指标和特异的免疫靶向治疗靶点。DKK1外周血中的高表达被证明可以成为多种肿瘤预后差的标志,如食道癌、骨肉瘤、肺癌和多发性骨髓瘤等。Forget等发现,DKK1在激素抵抗型乳腺癌组织中(雌激素受体阴性、孕激素受体阴性的乳腺癌)内呈高表达状态,DKKI的表达可能与乳腺癌的侵袭转移、分子分型及遗传相关,DKKI阳性表达的乳腺癌患者相对于DKKI表达阴性的患者预后更差。但具体机制目前不清。同样是激素依赖性肿瘤,那么在子宫内膜癌中会不会存在类似的现象呢？但目前国际上关于DKK1在妇科肿瘤中的研究并不多见,主要是对宫颈癌和卵巢癌中表达和作用机制探讨。而关于DKK-1在不同的激素受体状态子宫内膜癌中的表达和作用机制研究尚未见报道。本文首先探讨DKK1在不同子宫内膜癌细胞株和和不同雌孕激素受体状态子宫内膜组织中的表达情况,接着用体外实验研究DKK1在雌孕激素受体阴性的JEC细胞中的致癌机制,最后探讨DKK1对子宫内膜癌的诊断价值,为阐明子宫内膜癌发生机制和寻找其有效诊断指标提供新的靶标和理论依据。　　 方法：⑴采用RT-PCR、Western blot和免疫荧光技术检测对子宫内膜癌细胞株RL-952,Ishikawa,JEC中DKK1的表达。采用免疫组化检测DKK1在不同雌孕激素受体状态子宫内膜癌组织之间表达差异,并探讨DKK1表达与子宫内膜癌临床病理特征之间的关系。⑵针对DKK1mRNA序列设计了三条DKK1特异性的siRNA(DKK-homo-366,DKK-homo-811,DKK-homo-886)和一条阴性对照(nonsilencing)siRNA,用脂质体介导的方法将DKKlsiRNA转染入JEC细胞,用RNAi抑制JEC细胞中DKK1的表达。采用实时荧光定量PCR和Western blot检测干扰效果,Transwell小室、MTT、流式细胞仪分别检测干扰前后细胞侵袭、迁移、增殖和细胞凋亡的变化。⑶采用ELISA方法检测健康体检妇女20例,子宫内膜良性病变妇女20例和子宫内膜癌患者40例外周血清DKK1浓度,用ROC曲线探讨DKK1对子宫内膜癌的预测价值。　　 结果：①半定量RT-PCR和Western blot的结果显示DKK1在三株细胞中均有表达。Western blot的结果提示DKK1蛋白在JEC细胞株中表达最高。免疫荧光结果显示DKK1主要表达在癌细胞浆和细胞膜上。免疫组化结果显示DKKI蛋白主要表达于子宫内膜癌腺上皮上,基质中少量表达。DKKI在雌孕激素受体阴性子宫内膜癌组织中的表达水平高于雌或孕激素受体阳性组和正常子宫内膜组,差异具有统计学意义(p＜0.05)。DKKI在雌或孕激素受体阳性组中的表达低于正常子宫内膜组,但差异不具有统计学意义(P＞0.05)。DKKI蛋白表达水平与雌孕激素受体状态、有无淋巴结转移密切相关(p＜0.05),而与患者年龄、病理分级、分期无关(P＞0.05)。②实时荧光定量RT-PCR和Western blot结果显示RNA干扰组DKK1表达低于NC对照组,差异有统计学意义(均为P＜0.05)。对照组和空白对照组比较,DKK1蛋白的表达无明显差异(P＞0.05)。干扰DKK1可以降低JEC的侵袭、迁移和增殖能力,而促进JEC细胞凋亡。干扰DKK1可上调JEC细胞中β-catenin的表达。③子宫内膜癌患者外周血清中DKK1的浓度高于良性子宫内膜病变患者和正常健康妇女,差异有统计学意义(p＜0.05)。子宫内膜癌患者外周血清中DKK1的浓度在雌孕激素受体阴性组浓度最高,其次雌孕激素受体阳性组,雌或孕激素受体阳组最低,三者比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。以DKK1≥44286.00pg/mL为切断值,预测子宫内膜癌的敏感性为85％,假阴性15％,假阳性10.0％,特异性90％。　　 结论：⑴DKK1在RL-952,Ishikawa,JEC细胞中均有表达。DKK1在雌孕激素受体阴性子宫内膜癌组织中高表达。DKK1蛋白表达与雌孕激素受体状态、有无淋巴转移密切相关,而与患者的年龄、病理分期、分级无关。⑵RNAi技术可有效抑制子宫内膜癌细胞JEC中DKK1的表达。沉默DKK1基因可以抑制JEC细胞的增生、侵袭、迁移,并促进其凋亡。在JEC细胞中,DKK1可能通过Wnt之外的信号途径促进癌细胞的增生和侵袭。⑶DKK1在子宫内膜癌患者外周血清中高表达。以DKK1≥44286.00pg/mL为切断值,可有效预测子宫内膜癌。⑷DKK1是潜在子宫内膜癌标志物。