Occludin蛋白在重症急性胰腺炎小鼠肠上皮细胞的表达

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目的观察小鼠重症急性胰腺炎肠上皮occludin蛋白表达变化,初步探讨occludin蛋白与肠粘膜屏障损伤的关系。方法雄性昆明种小鼠40只,体重20-25g,随机分为对照组(n=8)、实验组(n=32)。实验组另分为3、6、12、24h四个时间点,每个时间点8只。所有小鼠在实验前禁食12 h,自由饮水。实验组小鼠腹腔分两次注射20%精氨酸(每次剂量250mg/100g),注射间隔为1 h。对照组腹腔注射等体积的无菌生理盐水。对照组小鼠末次注射后立即处死,实验组小鼠在末次注射后3、6、12、24h随机各取8只处死,取出胰腺组织、回肠组织,胰腺组织HE染色观察组织形态,肠组织电镜下观察肠上皮超微结构改变,并应用免疫组化测定紧密连接蛋白occludin表达。结果对照组电镜下肠上皮超微结构未见异常;实验组3h无明显变化,实验组其他时点可见肠上皮微绒毛稀疏、排列不整齐,部分断裂、脱落;细胞器受损,核内异染色质浓缩且边集,细胞连接增宽,24h时改变最明显。免疫组化显示对照组紧密连接蛋白occludin均匀一致地分布于肠上皮细胞连接处的顶端;实验组分布不均,occludin表达随时间推移表达逐渐降低,24小时达最低。对照组与实验组各组平均光密度值分别为0.3448±0.0028,0.3431±0.0020,0.3423±0.0019,0.3394±0.0015,0.3095±0.0027,3h时与对照组相比无统计学意义,6h、12h、24h与对照组之间有统计学差异。结论重症急性胰腺炎小鼠早期即有肠粘膜屏障损伤,肠上皮细胞间连接增宽,其可能机制与肠上皮occludin蛋白的表达降低有关。
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