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目的:慢性充血性心力衰竭(CHF)是一种复杂的临床症候群,因心室长期高压力或过重的容量负荷,导致心肌收缩力减弱,造成心室排血量不能维持。近几年中医药治疗心衰的研究越来越受重视。薛一涛教授通过多年临床研究组方复心汤,治疗心衰效果明显;本课题组成员陈炜、陈瑞雪等先后通过观察复心汤对心衰大鼠心肌组织与正常大鼠乳鼠心肌细胞中PI3K-AKT-GSK3β及IP3-Ca2+/CaM-CaN,GATA4/PKA/ERK、CAN/NFAT/GATA4信号通路的影响,来探讨复心汤通过信号转录通路干预心衰的原理机制,并取得了预期的效果,为后续课题实验提供经验与理论支持。本次研究通过观察复心汤对正常大鼠二代心肌成纤维细胞DAG/PKC/ERK/NF-κB信号通路的影响,同时对病人BNP水平、心功能疗效、中医证候、生活质量等进行评估,为临床研究开拓新思路。方法:1、动物实验:健康成年的雄性Wistar大鼠50只,随机等分为空白对照组、复心汤低、中、高剂量组、缬沙坦组,分别给予生理盐水,低、中、高剂量复心汤及缬沙坦每天1次灌胃,2周后提取分离血清,滤菌后冻存备用。用新生2-3天Wistar大鼠乳鼠心脏取心肌成纤维细胞培养及传代后,加入含药血清处理。用MTT法确定干预时间及分组所需最佳浓度梯度,将复心汤低、中、高剂量组及缬沙坦组分别分为10%与15%浓度,干预时间设置为24h及48h,经酶标仪检测分析后,得出复心汤中剂量组15%浓度、西药组15%浓度,干预48h,为最佳浓度和干预时间,以此为依据进行后续实验。用Elisa、Western-blot法检测心肌成纤维细胞中DAG/PKC/ERK/NF-κB的表达情况或定量分析2、临床疗效观察:随机选择符合纳入标准的CHF住院病人60例,分为实验组、对照组,实验组用复心汤配合西药治疗,对照组用缬沙坦配合常规西药治疗。6周后观察患者治疗前后BNP水平、心功能疗效分级、中医症候计分、Lee氏心衰计分及生活质量评分。所有研究指标的结果建立数据库,以X±S表示,使用SPSS17.0统计软件对数据处理分析。结果:1、动物实验结果:(1)用Elisa法检测心肌成纤维细胞中DAG表达量,结果示:与空白组比较,复心汤组与西药组表达量降低(P<0.05),有统计学差异;复心汤组与西药组表达量相比较(P>0.05),无统计学意义。(2)用Western blot法检测大鼠心肌成纤维细胞中PKCα/ERK/NF-κB的表达。结果显示复心汤组、西药组、空白组两两相互比较,PKCα无明显差异,无统计学意义(P>0.05)。P-PKCα表达量:由高到低依次是空白组、复心汤组、西药组;复心汤组与空白组相比较,P-PKCα表达量减少,有统计学差异(P<0.05),西药组与复心汤及空白组比较,P-PKCα表达量明显减少,有显著统计学差异(P<0.001)。ERK1/2、P-ERK1/2、NF-κB表达量统计学示:除去西药组与复心汤组相比,ERK1/2表达量无明显变化,无统计学意义(P>0.05),其余各组比较均有统计学差异(P<0.05或P<0.01),此外西药组P-ERK1/2、NF-κB表达量,与复心汤组及空白组分别对比,有显著统计学差异(P<0.01)。2.临床疗效观察:(1)中医症候改善率:治疗后试验组总疗效率96.7%,对照组总疗效率73.3%,有统计学差异(P<0.05),在改善中医临床症状方面复心汤疗效优于缬沙坦。(2)Lee氏心衰计分:治疗后两组与治疗前对比分值明显降低,有显著统计学差异(P<0.01),试验组有效率77%,对照组有效率73%,无明显统计学意义(P>0.05),说明在改善Lee氏心衰症状方面两者效果相当。(3)患者BNP水平:治疗后两组病例BNP明显降低,组内对比(P<0.01),有显著统计学差异,说明试验组与对照组的BNP水平都得到了显著改善。治疗后两组对比,无统计学意义(P>0.05),表明复心汤与缬沙坦在改善BNP水平方面疗效相当。(4)心功能改善率:试验组总有效率93.33%,对照组总有效率66.67%,经秩和检验,P<0.05,有显著统计学差异,复心汤组疗效优于缬沙坦组。(5)生活质量评分:两组患者治疗后,明尼苏达心力衰竭生活质量评分较治疗前明显降低(P<0.01),治疗后两组患者组间对比,有显著统计学差异(P<0.01),表明复心汤组效果明显优于缬沙坦组。结论:1.复心汤可通过心肌成纤维细胞作用于DAG/PKCα/ERK/NF-κB信号通路。2.复心汤、缬沙坦均能降低心肌成纤维细胞中P-PKCα、ERK1/2、P-ERK1/2、NF-κB表达量,且复心汤表达量降低程度小于缬沙坦,以此探讨并推测两者均能通过该信号通路达到抑制心肌成纤维细胞增值,缓解心肌纤维化,逆转心肌重构的目的,从而或影响心衰。3.复心汤可改善患者中医症候,其疗效优于缬沙坦。4.复心汤能改善Lee氏心衰症状,且疗效与缬沙坦相当。5.复心汤可明显降低患者BNP水平,且疗效与缬沙坦相当。6.复心汤可明显改善患者心功能(NYHA心功能分级),其疗效优于缬沙坦。7.复心汤可明显改善心衰患者的生活质量,其疗效优于缬沙坦。