禽大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的传染性疾病,是导致禽类发病和死亡的重要原因之一,给家禽养殖业造成了巨大的经济损失。目前,在养殖端施行限抗、禁抗已成为必然趋势,噬菌体治疗有望成为代替抗生素的一种新方法。本研究从四川成都某鸡场的污水中,分离纯化出多株大肠杆菌噬菌体,并筛选出1株宽裂解谱的大肠杆菌噬菌体,通过对该噬菌体进行生物学特性测定、全基因组生物信息学分析及初步防治试验的研究,为大肠杆菌噬菌体的临床应用提供了依据。1.噬菌体分离鉴定、生物学特性研究和全基因组生物信息学分析本试验以实验室保存的55株禽源大肠杆菌为宿主菌,通过双层琼脂平板法从鸡场的污水中分离纯化筛选出1株宽裂解谱的大肠杆菌噬菌体,将其命名为Bp16,该噬菌体可在双层琼脂平板上形成圆形、边缘整齐透明的噬菌斑,用2%磷钨酸负染后,于透射电镜观察其形态结构,透射电镜结果显示,噬菌体Bp16的头部为正二十面体结构,有尾且有尾丝,体长约为220 nm,根据形态结构判断该噬菌体为尾噬菌体目、肌尾噬菌体科的成员。通过点滴法测得其裂解效率为12.73%;通过双层琼脂平板法和平板计数法测得噬菌体裂解液的效价为6.7×1010PFU/m L;通过测定噬菌体Bp16对温度和p H稳定性、最佳感染复数（MOI）,以及一步生长曲线等生物学特性,研究结果表明该噬菌体在37℃～60℃作用30min或1 h噬菌体效价基本保持不变,且在80℃作用1 h后效价仍能达到1×104PFU/m L以上,p H 5～10之间效价基本保持不变,最佳MOI为1,根据一步生长曲线测得其潜伏期为20 min、暴发期为50 min、裂解量为73 PFU/cell;生物信息学分析结果表明,该噬菌体的核酸类型为双链DNA,基因组全长为170004bp,GC含量为37.60%,有2种t RNA,分别转运精氨酸（Arg）和蛋氨酸（Met）,预测到140个ORF,遗传进化分析结果表明,该噬菌体为尾噬菌体目、肌尾噬菌体科、Tevenvirinae亚科、Mosigvirus属。以上研究结果表明,噬菌体Bp16具有热稳定性、耐酸碱以及裂解能力强等特性,为后续噬菌体治疗试验奠定了基础。2.大肠杆菌噬菌体治疗效果评价试验本研究通过攻毒试验测定大肠杆菌半数致死量,在感染大肠杆菌前6h、3h、感染同时、感染后3h、6h腹腔注射1.5×108PFU的噬菌体悬液,验证该噬菌体对大肠杆菌病的防治作用,并研究其最佳治疗剂量。研究结果表明,该株大肠杆菌的半数致死量为1.5×108cfu;治疗试验中,在雏鸡感染大肠杆菌前3h和前6h接种噬菌体悬液,保护率均达到100%,在雏鸡感染大肠杆菌同时、感染后3h和感染后6h接种噬菌体悬液,保护率分别为80%、80%和70%,抗生素治疗组的保护率为70%,说明该噬菌体对大肠杆菌感染具有一定的防治作用;通过以七日龄雏鸡为试验动物的最佳治疗剂量试验,探索出最佳治疗剂量为1.5×109PFU。以上研究结果表明,噬菌体Bp16对大肠杆菌病具有防治作用,为治疗该病提供了良好的试验材料。