放线菌次线代谢产物肉桂酰胺的生物合成及菌种鉴定

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肉桂酰胺是一种重要的有机合成中间体,被广泛的应用于医药和精细化工领域。肉桂酰胺本身也具有一定的药理和生物活性。   本论文通过菌种筛选发现一株可以代谢产生肉桂酰胺的放线菌菌株。对该菌株进行了16S rDNA核苷酸全序列的测定,结合其形态培养特征生理生化特性,将菌株CGMCCNo.4487初步分类为链霉菌属,与Streptomyces turgidiscabies属于同一种。   通过Placket-Burman法实验设计和响应面的中心组合设计,就菌株CGMCC No.4487代谢生成肉桂酰胺的发酵培养基条件进行初步研究。结果表明,蛋白胨的含量和接种pH值是肉桂酰胺生物合成的最显著影响因子,葡萄糖和黄豆粉对肉桂酰胺的浓度也有明显影响。经过发酵培养基的优化,肉桂酰胺产量在原先160mg/L的基础上可显著提高75%,这是首次实现生物法大量合成肉桂酰胺,并且具有工业化生产的潜力。   对菌株CGMCC No.4487次级代谢产生肉桂酰胺的生物合成途径进行了初步的探究。采用HPLC对发酵过程中发酵液的主要成分进行跟踪检测,初步验证了在筛选所得的放线菌CGMCC No.4487中,肉桂酰胺代谢合成并非遵循文献报道的“L-苯丙氨酸--肉桂酸”代谢途径。采用添加不同代谢途径抑制剂的策略初步判定肉桂酰胺的代谢生成和聚酮途径有关。
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