我国畜禽养殖业发展迅速，抗生素已经成为临床治疗病原感染的有力武器；同时还作为畜禽饲料添加剂，在畜禽疾病预防和促生长方面发挥重要作用。但是，随着抗生素的广泛应用，严重破坏了畜禽肠道的微生物平衡，而且相应的细菌耐药性问题也随之愈发严重。在这种状况下，医药领域迫切需要寻求新的制备途径，以期获得抗菌活性更强、范围更广的新型抗菌剂。　　 抗菌肽(Antimicrobial Peptides，简称APs)是生物细胞特定基因编码产生的一类小分子多肽，是宿主防御病原微生物入侵的重要分子屏障，其生成和释放是机体炎症反应的组成部分。抗菌肽不仅对革兰氏阴性细菌和革兰氏阳性细菌具有高效广谱的杀灭能力，而且对某些病毒、真菌和原虫也具有抑杀作用，同时对一些肿瘤细胞具有选择性杀伤作用，但对正常哺乳动物和昆虫细胞却无明显的毒副作用。抗菌肽Cryptonin 是果树上淡黑色的蝉体内分泌的具有广谱抗菌活性的多肽。　　 本研究根据毕赤酵母（Pichia pastoris）密码子的偏嗜性，通过SOEing法合成改造后的Cryptonin基因片段。基因克隆到ppIczac质粒中，获得分泌型重组酵母表达载体pPICZaC-Cry。pPICZaC-Cry通过限制性内切酶SacI酶切线性化后，经电穿孔法转入毕赤酵母细胞X-33内。ZeocinTM抗性筛选，得到高拷贝转化子，PCR检测Cryptonin基因与毕赤酵母染色体稳定结合。在AOX（醇氧化酶）启动子调控下，分子量约为2.7kD的Cryptonin蛋白获得分泌表达，其上清表达量约为232mg/L。表达产物耐热性强，在100℃条件下煮沸10min内抗菌活性不变，煮沸60rain仍具有活性。表达的抗菌肽Cryptonin对大肠杆菌(Escherichia coli)K99和金黄色葡萄球菌(CowanI)的最小抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration, MIC)分别为3.12ug/mL和25μg/mL.　　 以昆明种小鼠为对象，初步研究了重组抗菌肽Cryptonin防治小鼠细菌感染的效果。通过预试验，确定了选用的金黄色葡萄球菌(cowanI)和致病性大肠杆菌K99对小鼠的最小致死剂量(MLD100)和抗菌肽体内保护剂量的参考值。在治疗实验中，在致死剂量的金黄色葡萄球菌（CowanI）和大肠杆菌K99腹腔注射后，腹腔注射200μg 抗菌肽Cryptonin有一定的治疗效果，48h后小鼠存活率分别为62.5％和75％。表明，抗菌肽Cryptonin有较好的体内防治效果。　　 综上所述，本研究成功地应用基因工程和蛋白质工程技术表达了蝉抗菌肽Cryptonin，表达出来的蛋白在体内外均表现出良好的抗菌活性，为抗菌肽Cryptonin的工业化生产和在畜牧养殖业中的应用奠定了基础。