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目的：
观察全反式维甲酸和不同剂量的化疗药物吉西他滨、顺铂联合处理A549人肺腺癌细胞株,以了解不同药物、不同剂量及不同作用时间对A549细胞增殖影响及其可能机制。
方法：
用MTT法测定:全反式维甲酸作用于A549细胞最适宜浓度;全反式维甲酸和化疗药物最适宜的联合用药时序关系;全反式维甲酸单药组、化疗药物单药组以及维甲酸和化疗药物联合用药组分别作用于A549细胞相对于对照组细胞增殖抑制率的变化。运用westernblot方法检测维甲酸单药组、化疗药物单药组以及维甲酸和化疗药物联合用药组p-ERK,RRM1,P-糖蛋白的表达情况。
结果：
MTT结果显示,以不同浓度ATRA作用于A549细胞,随着ATRA浓度的上升,在ATRA浓度小于20μmol/L时对于A549细胞的抑制作用也有一个明显的提升(P＜0.01),但当ATRA浓度大于20pmol/L以后各组抑制率差别不大(P＞1)。而ATRA和顺铂以不同的先后顺序处理A549细胞显示了不同的抑制效果,当顺铂作用后4h和顺铂作用后12h再加入ATRA联合作用后A549细胞的抑制率和其他时间点比较有显著差异(P＜0.01),但两组之间差异并不明显(P＞1)。可以认定该两组化疗药物作用后4h和化疗无作用后12h再加入ATRA联合作用A549细胞均可达到最佳的抑制效果。各实验组药物处理A549细胞24h后MTT结果显示,吉西他滨浓度在2.0mg/L、4.1mg/L时维甲酸的增效作用并不明显,进一步加大浓度可见抑制率上升明显。在同等吉西他滨药物浓度情况下,联合全反式维甲酸可见A549细胞增殖抑制率明显上升。而维甲酸联合每一个顺铂浓度组在抑制率的比较上都有一定程度的提升。同样,在同等顺铂药物浓度情况下,联合全反式维甲酸可见A549细胞细胞增殖抑制率明显上升。Westernblot结果显示各个药物处理组处理A549细胞24h后,除RRM1蛋白表达均较低外各表达条带均可见明显差别,p-ERK的表达在维甲酸单药组、化疗单药组和对照组差别不明显,但联合用药组可明显见到条带减弱,P-糖蛋白虽然各组表达都较弱,但仍可以看出在化疗单药组和对照组中差别不明显,而加入ATRA的处理组P-糖蛋白表达减进一步减弱。
结论：
全反式维甲酸和各浓度的顺铂、吉西他滨联合用药可以在达到同等抑制效果的情况下减少顺铂及吉西他滨所需要的浓度。全反式维甲酸可通过抑制ERK-MAPK通路,间接或直接抑制RRM1和P-糖蛋白的表达,从而在增加化疗敏感性的同时降低化疗耐药风险的效果。