三个水稻生殖发育突变体的遗传分析及有关基因的分子标记定位研究

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水稻生殖发育突变体的获得和研究,在揭示生殖发育过程中基因的作用及其相互关系,探明水稻的生殖发育,特别是花发育的奥秘起了十分重要的作用。研究水稻生殖发育机制具有重要的理论意义和实际应用价值。本课题组从明恢86的组培材料F2群体中发现了三份可以稳定遗传的水稻生殖发育突变体ps2(pistilloid-stamen-2)、ohs1(open hull sterilel)和fro1(function of reproductiveorgan 1)。其相应基因拟名为ps2(t)、ohs1(t)和fro1(t)。本研究从主要从遗传学以及分子标记基因定位两个方面对ps2、ohs1和fro1进行研究,为今后基因表达和克隆等奠定基础。主要的研究结果如下:fro1突变体内外稃闭合,抽穗但不开花;4轮器官结构及数目近正常,但内外稃片抱合扭曲成辣椒果实形状,雌雄蕊发育不完全,呈透明色,雌雄蕊均不育。ps2突变体有点像Luo等(2006)报道的ps突变体。该突变体颖花开裂,内外颖片变窄、变硬,外颖弯曲;雄蕊转化成雌蕊,极少数留有1枚未转变的雄蕊,突变体雌蕊的数目10以上,不能结实。ohs1为颖花开裂,内稃微弯向外稃。有雌雄蕊发育,花药没有花粉或只有少数不育花粉,不能结实。其雌雄蕊比正常株的颖花的雌雄蕊要小。遗传分析表明ps2、ohs1和fro1均是单隐性基因控制的突变体。fro1和ps2双突变体表型显示内外稃片结构及开裂特征像ps2,而内外稃包合状似fro1;雄蕊仍表现雌化,但数目明显减少。这些表型特征暗示了ps2(t)和fro1(t)间存在一定的互作,ps2(t)可能对fro1(t)存在部分上位性;ps2(t)可能是一个水稻器官结构特征基因,而fro1(t)可能与水稻生殖细胞形成有关,是一个水稻生殖器官功能特征基因。以ps2、ohs1和fro1与96-11和中花16杂交构建F2为定位群体,采用微卫星标记技术,应用BSA分析方法,分别对ps2(t)、ohs1(t)和fro1(t)进行分子标记基因定位。发现第1号染色体上的RM3252和RM3453与ps2(t)连锁,且在ps2(t)的两侧,定位结果与已发表的ps突变体(Luo H et al.2006)的同在1号染色体的短臂端相同区域。对于ohs1分析,位于第1染色体上的RM493、NSSR0115、NSSR0107和RM5638与ohs1(t)连锁。其中RM493位于ohs1(t)的一侧,NSSR0115、NSSR0107和RM5638位于ohs1(t)的另一侧。RM493与ohs1(t)的遗传距离分别为7.8cM,NSSR0115、NSSR0107和RM5638与ohs1(t)的遗传距离为0.35cM、1.3cM和2.1cM。共用406对SSR引物对fro1与93-11进行多态性筛选,其中有90对引物在两亲本间表现出多态性,多念性比例为27%。但未找到与fro1(t)连锁的标记,对fro1(t)的基因定位仍在进行中。
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