目的:许多细胞遗传学异常现象的研究结果显示,l号染色体和/或l号染色体末端lp36区存在杂合性缺失和染色体获得,这些结果提示在此区可能存在重要的抑癌基因或癌基因。我们在完成人类1p35-1p36的基因图谱的基础上,利用克隆筛选技术,在1p36区克隆出了一个新的癌基因,编号为KIA0090,我们命名该基因为PPO(Phosphorylation and Proliferation Oncogene)。初步试验研究发现,该基因在人类多种癌组织中都有相应过表达,经过基因重组后,在细胞水平和活体水平证实与增殖和磷酸化有关。通过对大量肿瘤组织的免疫组化筛选研究,发现PPO基因在间叶组织来源的肿瘤中不表达,在上皮组织来源的肿瘤中有过表达,关系密切。为进一步证实PPO基因与腺癌的关系,运用免疫组化、RT-PCR及Western法,了解该基因在腺癌组织中阳性表达情况,从而为腺癌诊断的标记物及分子靶向治疗提供研究方向。方法:标本分别从河北医科大学第三医院、河北医科大学第四医院术后收集。HE及免疫组化所用标本经手术切除后,置于10%福尔马林溶液固定。RT-PCR及Western所用标本为手术中切除新鲜组织,切除后立即存放在液氮中,然后冻存于-80℃超低温冰柜中手术切除标本均经组织病理学确诊。标本包含甲状腺癌、肺腺癌、肺鳞癌、肺小细胞癌、乳腺癌、食管鳞癌、胃癌、肝癌、胆管癌、结肠癌、子宫内膜癌、卵巢癌、前列腺癌等多种肿瘤标本。每种肿瘤进行3-5个标本的免疫组化分析,胃癌、肝癌、结肠癌、卵巢癌进行RT-PCR分析,肺腺癌、卵巢癌进行Western-blot分析。结果:PPO基因在甲状腺癌、肺腺癌、乳腺癌、胃癌、肝细胞癌、胆管癌、结肠癌、子宫内膜癌、卵巢癌、前列腺癌都有明显过表达;PPO基因在肺鳞癌、肺小细胞癌、食管鳞癌、孤立性浆细胞肉瘤组织、软骨肉瘤组织、骨组织恶性纤维细胞瘤组织、恶性淋巴瘤组织、恶性神经纤维瘤组织、多发骨髓瘤组织、恶性纤维组织细胞瘤组织、原始神经外胚瘤组织、脂肪瘤组织均无表达。Western证实了免疫组化结果,RT-PCR结果显示PPO基因在胃癌、肝癌、结肠癌、卵巢癌组织中有明显过表达,而在其正常组织中少量存在。结论:1 PPO基因符合癌基因的特点。RT-PCR结果显示PPO基因在胃癌、肝癌、结肠癌、卵巢癌组织中有明显过表达,而在其正常组织中少量存在,由此我们可以说,PPO基因存在于正常组织中,在癌组织中被激活后其表达量明显增加,是一个新癌基因。2 PPO基因在肺腺癌组织有过表达,在肺鳞癌组织及肺小细胞癌组织中无表达。3 PPO基因在卵巢单纯性囊肿上皮组织中有少量表达,在卵巢粘液性囊腺瘤组织、卵巢交界性粘液性乳头状囊腺瘤组织有表达、在卵巢粘液性囊腺癌组织、卵巢浆乳癌中有明显过表达,并且随着肿瘤恶性程度增加而增多。4 PPO基因在甲状腺癌、肺腺癌、乳腺癌、胃癌、肝细胞癌、胆管癌、结肠癌、子宫内膜癌、卵巢癌、前列腺癌都有明显过表达。5 PPO基因在孤立性浆细胞肉瘤组织、软骨肉瘤组织、骨组织恶性纤维细胞瘤组织、恶性淋巴瘤组织、恶性神经纤维瘤组织、多发骨髓瘤组织、恶性纤维组织细胞瘤组织、原始神经外胚瘤组织、脂肪瘤组织中均无表达。6 Western证实了免疫组化结果,PPO基因在卵巢癌组织、肺腺癌组织中有表达,而在骨肉瘤组织中无表达。7通过此次实验筛选,我们发现PPO基因只在腺癌中表达,从而为腺癌诊断的标记物及分子靶向治疗提供研究方向。