【摘 要】
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松木层孔菌(Phellinus pini)隶属于担子菌亚门,层菌纲,非褶菌目,多孔菌科,针层孔菌属。本文通过液体发酵培养技术获得松木层孔菌发酵液。松木层孔菌发酵液经乙醇沉淀,得到松
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松木层孔菌(Phellinus pini)隶属于担子菌亚门,层菌纲,非褶菌目,多孔菌科,针层孔菌属。本文通过液体发酵培养技术获得松木层孔菌发酵液。松木层孔菌发酵液经乙醇沉淀,得到松木层孔菌胞外粗多糖CPPE,利用苯酚-硫酸法和凯氏定氮法测得该多糖的总糖含量和蛋白含量分别为33.56%和31.68%。采用冻融分级、链霉蛋白酶和sevag法联合脱蛋白及Sepharose CL-6B凝胶层析等方法对CPPE进行纯化,得到级分PPE。PPE为淡黄色粉末,比旋光度为+21.3°,总糖含量为92.84%,HPLC检验PPE为单一峰,平均分子量为39kDa,单糖组成为甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其摩尔比为38.4:1.76:1。采用部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化等化学分析方法及IR、GC、GC-MS、13C-NMR等仪器分析方法对PPE进行了结构分析。确定了PPE的重复结构单元。PPE的基本结构为:α-(1→2)-D-Manp构成主链,每8个糖残基构成一个重复结构单元,从Man的O-6分出支点连接侧链,α-(1→2)-D-Manp和α-(1→2,6)-D-Manp的摩尔比为0.78:1;侧链由α-(1→3)-D-Manp和α-(1→6)-D-Manp构成,其摩尔比为3.71:1;Man构成PPE的末端。应用MTT法初步考察了PPE对小鼠体外淋巴细胞增殖的影响。结果表明:PPE能促进小鼠脾淋巴细胞增殖,同时也可协同有丝分裂原ConA和LPS促进小鼠脾T、B淋巴细胞的增殖。
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