昆虫病原Photorhabdus属细菌为昆虫病原异小杆属Heterorhabditis线虫的共生细菌，在这类线虫的产业化培养中发挥重要作用。初生型共生细菌产生两种型态的胞内晶体蛋白CipA及CipB。由于此类晶体蛋白不能为细菌自身所利用，且氨基酸组成与线虫的营养需求相似，它们的大量产生被认为与细菌的共生性有关。鉴于共生系统的复杂性及其它代谢物质的干扰，胞内晶体蛋白的生物学功能一直未能确定。共生细菌胞内晶体蛋白的研究，不仅有利于线虫—细菌共生机制的探索，而且将促进线虫的产业化。 为探索共生细菌产生的胞内晶体蛋白在共生系统中的生物学功能，本论文从P．luminescens H06菌株中扩增其编码基因cipA、cipB，并分别在原核(大肠杆菌)和真核(酿酒酵母)表达系统中表达，然后分别将重组菌株与三种昆虫病原线虫[Steinernema longicaudum X-7(X-7)、S．carpocapsae All(All)和Steinernema sp．Sy-5(Sy-5)]以及海洋饵料线虫Panagrellus redivivus共培养，生物测定所表达的目的蛋白对线虫生长发育的影响。 结果表明：H06菌株的cipA和cipB序列与业已报道的Hm菌株对应序列的同源性均为93％。 在构建pCR4-TOPO-cipA和pCR4-TOPO-cipB克隆载体的基础上，论文构建了两种原核高效表达载体pET-15b-cipA及pET-15b-cipB，以化学转化法对蛋白酶缺陷型大肠杆菌BL21(DE3)进行转化并在抗性平板上筛选出阳性克隆。所构建的重组质粒在宿主菌中具有良好的稳定性，无选择压力下传代培养，目的蛋白表达量保持在菌体总蛋白的27％～35％。重组CipA及CipB蛋白的诱导表达量分别达到30.9％和32.6％，均于胞内形成包涵体蛋白，胞外未有目的蛋白的渗漏表达。以温和的、非机械破壁方法初步纯化重组CipA、CipB蛋白以及H06菌株产生的Cip蛋白混合物，三者的得率分别为：78.8％、88.9％、89.1％。通过五次免疫新西兰大耳兔分别获得CipA及CipB的多克隆抗血清，间接ELISA法监测免疫过程实验动物血清中抗体的产生情况；免疫印迹检测说明由大肠杆菌大量表达的重组蛋白即为P．luminescens H06菌株的两种胞内晶体蛋白CipA和CipB。 生物测定发现：液体培养状态下，胞内晶体蛋白作为线虫重要的营养来源，并与第二代感染期线虫的形成直接相关。以可大量表达重组胞内晶体蛋白的大肠杆菌分别与无菌一龄Steinernema longicaudum X-7、S．carpocapsae All以及Steinernema sp．Sy-5线虫建立固体及液体培养组合，结果表明，在液体培养系统中，除了All品系线虫在CipB蛋白中未能完成发育外，所有测定线虫都能够于存在至少一种Cip蛋白的组合中完成世代，获得感染期线虫，没有Cip蛋白存在的组合，未能获得感染期线虫；固体培养系统中，测定线虫可在所有组合中完成世