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目的:1、检测人子宫内膜癌HEC-1-A细胞是否表达VDR;2、观察1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对人子宫内膜癌HEC-1-A细胞增殖的影响,并且检测其作用下S期激酶相关蛋白(Skp2)基因、抑癌基因p27表达情况,以探讨其抗癌机制;3、探讨1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]与顺铂联合对人子宫内膜癌HEC-1-A细胞的增殖抑制情况,并测定二者作用下S期激酶相关蛋白(Skp2)、抑癌基因p27蛋白表达情况,进一步探讨它们的作用机制。方法:1、应用RT-PCR、免疫组织化学方法检测人子宫内膜癌HEC-1-A细胞表达VDR;2、选用人子宫内膜癌HEC-1-A细胞进行体外培养,用CCK-8法测定不同浓度1,25(OH)2D3对细胞作用不同时间后细胞生长抑制率,流式细胞仪进行细胞周期分析,采用RT-PCR、荧光实时定量PCR在mRNA水平及Western blotting在蛋白质水平检测Skp2/p27基因表达的变化;3、用CCK-8法测定1,25(OH)2D3、顺铂及二者联合对细胞作用后细胞增殖情况,流式细胞仪进行细胞周期分析,采用Western blotting在蛋白质水平检测Skp2/p27基因表达的变化。结果:1、人子宫内膜癌HEC-1-A细胞表达VDR,且定位于细胞核内。2、(10-8-10-6)mol/L浓度的1,25(OH)2D3作用于HEC-1-A细胞1-5d范围内各不同浓度处理组细胞生长增殖均受到明显抑制,并且随着作用浓度增加,细胞增殖能力逐渐下降;1,25(OH)2D3能增加G0/G1期细胞比例,降低S、G2/M期细胞比例,从而降低细胞增殖指数(P<0.01);在mRNA、蛋白质水平上,能降低Skp2表达(P<0.001),而p27mRNA减少,p27蛋白表达显著增加(P<0.001)。3、与对照组相比,1,25(OH)2D3、顺铂作用下细胞吸光度(OD)值减少,细胞增殖受到抑制(P<0.01),二者联用时此作用明显增强;二者作用下G0/G1期细胞增多,Skp2表达减少,p27蛋白表达增多。结论:1、人子宫内膜HEC-1-A细胞核内表达VDR,可选作1,25(OH)2D3研究、治疗的细胞株。2、1,25(OH)2D3对人子宫内膜癌HEC-1-A细胞有抑制作用,可能通过转录水平下调Skp2基因表达,同时由于Skp2的减少增加p27蛋白稳定性,减少其降解,从而产生抑癌作用。3、1,25(OH)2D3有增强顺铂抗肿瘤的作用,二者均可能通过下调Skp2、上调p27蛋白表达,从而抑制癌细胞增殖。