死后血液流动对氯胺酮的死后再分布影响

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目的我们的前期研究发现,氯胺酮灌胃中毒动物尸体在存放过程中,随着存放时间的延长,血液和部分组织中氯胺酮含量有显著性变化,即发生了死后再分布现象。为了探索氯胺酮在尸体存放期间的死后再分布机制,本实验建立了家兔静脉注射氯胺酮急性中毒的动物模型,研究死后血液流动是否会对氯胺酮在家兔体内的死后再分布产生影响。方法1.体液和组织中氯胺酮分析方法:家兔体液、组织样品匀浆后加入内标物SKF525A碱化,乙醚萃取,利用保留时间结合特征离子峰(GC/MS)定性分析,内标法和工作曲线法(GC-NPD)定量分析样品中氯胺酮含量。2.死后血液流动对氯胺酮的死后再分布影响:新西兰家兔56只,其中48只分别经右耳缘静脉注入40mg·kg-1剂量氯胺酮(实验组),对照组8只静脉注射等量生理盐水。48只实验组家兔再随机分为两组:一组动物死后立即结扎心脏周围大血管(主动脉),一组不结扎心脏周围大血管。将对照组和实验组家兔尸体仰卧位置于室温(19℃-24℃)条件下保存,分别于死后0h、3h、6h、12h、24h、48h、72h、96h取心肌、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃壁、心血、外周血、尿液、胆汁等10个样品,检测样品中氯胺酮含量。结果1.氯胺酮在血液和肝脏中的线性检测范围均为0.5~80(μg·mL-1或μg·g-1);最低检出限均为0.25μg;方法回收率为91.55%~134.37%;日内及日问相对标准差均小于6.0%。以40mg·kg-1剂量氯胺酮给家兔耳缘静脉注射,该剂量不足以使实验家兔很快死亡,且可满足实验定量检测分析。2.家兔以40mg·kg-1剂量氯胺酮耳缘静脉注射1.5h后,缺氧处死,急性中毒家兔体内氯胺酮的浓度大小依次是:尿>胆汁>胃壁>心脏、肺脏、肾脏、周围血>肝脏、脾脏、心血。3.家兔耳缘静脉注射氯胺酮处死后放置Oh-96h内,无论是否结扎心脏周围大血管,氯胺酮在家兔心肌、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、心血、周围血、胆汁中的含量变化与0h相比无显著性差异(P>0.05)。家兔在死后结扎和非结扎主动脉的条件下,死后放置96h内,两组实验家兔心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃壁、尿液、胆汁、心血、周围血等组织脏器中的氯胺酮浓度均无显著性差异(P>0.05)。结论1.建立的生物样品中氯胺酮的提取分离和GC分析方法以及家兔静脉注射氯胺酮急性中毒的动物模型,可用于氯胺酮静脉注射中毒的法医学研究。2.氯胺酮经家兔耳缘静脉注射1.5h后,广泛分布于家兔体内,尿中氯胺酮含量较高。3.家兔静脉注射氯胺酮处死后96h内,在结扎和非结扎主动脉的条件下,两组家兔尸体各组织脏器和体液中氯胺酮的含量没有统计学意义上的差异存在,提示死后血液流动不是氯胺酮在动物体内发生死后再分布的主要影响因素。
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