戊己丸对炎症后肠易激综合征大鼠脑肠肽影响的研究

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目的:寻找能够诊断和治疗肠易激综合征(IBS)的生物学指标,探索戊己丸治疗IBS的脑肠肽作用机制。  方法:(1)采用乙酸加束缚应激法建立炎症后肠易激综合征(PI-IBS)动物模型,对模型进行验证,检测大鼠造模前及给药前后结肠运动指数(MI)、2 h内排出的粪粒数以及玻璃小球排出时间;(2)PI-IBS大鼠随机分组后用戊己丸治疗,检测给药后各组大鼠MI、2 h内排出的粪粒数以及玻璃小球排出时间,观察药物对PI-IBS的作用。(3)ELISA法检测大鼠降钙素基因相关肽(CGRP)、胃动素(MTL)、神经肽Y(NPY)、P物质(SP)、生长抑素(SS)、血管活性肠肽(VIP)、胆囊收缩素(CCK)水平的变化。(4)UPLC-MS/MS法检测大鼠谷氨酸(Glu),肾上腺素(E),乙酰胆碱(Ach),γ-氨基丁酸(γ-GABA),多巴胺(DA),组胺(HA),5-羟吲哚乙酸(5-HIAA),5-羟色胺(5-HT),高香草酸(HVA),去甲肾上腺素(NE),天冬氨酸(Asp),甘氨酸(Gly)水平的变化。  结果:(1)成功建立大鼠PI-IBS模型。造模后各大鼠体重降低,摄食量减少,排便量增多、出现稀便和无定形软便,自主运动量减少,结肠推进率加快。其病理生理特征与临床研究结果基本吻合。建模之前,正常组与模型组之间的结肠运动指数、2h排出的粪粒数以及玻璃小球排出时时间均无差异;给药前,与正常组比较,模型组结肠 MI明显增加,差异非常显著(P<0.05),模型组大鼠排出的粪粒数明显增加,差异显著(P<0.05),模型组大鼠玻璃小球排出时间缩短,差异非常显著(P<0.05);(2)戊己丸治疗7 d后能够明显改善动物的PI-IBS症状。大鼠体重、摄食量增加,排便量减少、稀便减少,自主运动量接近正常。给药后,戊己丸中高剂量组较模型组 MI显著降低(P<0.05);戊己丸低中高剂量组大鼠粪粒数较模型组显著降低(P<0.05);戊己丸各给药组较模型组大鼠玻璃小球排出时间明显增加,差异非常显著(P<0.05)。(3)ELISA检测结果显示戊己丸能够显著降低PI-IBS大鼠脑组织CGRP、SS、VIP水平和升高NPY脑肠肽水平(P<0.05)。(4)UPLC-MS/MS检测结果显示戊己丸能够显著升高PI-IBS模型大鼠脑组织NE水平,低、高剂量组(P<0.05),中剂量组(P<0.01);戊己丸中、高剂量组能显著升高结肠组织GABA脑肠肽水平(P<0.01)。  结论:戊己丸可能通过调节IBS模型大鼠CGRP、NPY、SS、VIP、GABA、NE等脑肠肽的水平来治疗IBS,这些可被调节的异常变化的脑肠肽可能成为潜在的诊断和治疗IBS的生物学指标,可进一步应用于治疗IBS药物的代谢动力学-药效学研究。
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