微乳液介质荧光酮类试剂—钼(VI)光谱探针标记蛋白质的研究与应用

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蛋白质的定量测定在生化分析和临床分析中具有重要意义,研究开发新的高灵敏测定蛋白质的方法是生化研究的一个活跃领域。本文详细地论述了蛋白质定量测定与分析技术的发展趋势和荧光光谱法研究蛋白质与小分子的相互作用机理。论文从配合物光谱探针标记蛋白质的角度出发,主要采用分光光度法和光散射法研究了荧光酮类试剂-钼(VI)配合物作光谱探针测定微量蛋白质的分析化学性能,旨在建立新的测定蛋白质的分析方法,并将它们应用于蛋白质的定量测定。同时利用荧光光谱法探讨了配合物探针与蛋白质作用的机理(包括能量转移距离、作用力类型和结合常数等),从分子角度揭示了小分子与蛋白质的作用机制,并获得了一些创新性的成果。本论文的系统性、科学性和新颖性1、系统性系统研究了具有不同取代基的荧光酮类试剂-钼(VI)配合物探针与蛋白质的吸光光度条件和光散射条件,如酸度、介质及其用量、显色剂用量等;讨论了不同取代基对反应灵敏度的影响;测定配合物探针与蛋白质在微乳液、胶束和水相介质中的能量转移效率和作用距离,为微乳液的增溶增敏提供有力的佐证。2、科学性将建立的方法应用于尿样、人血清等样品中蛋白质的分析测定,取得了令人满意的结果;依据非辐射能量转移,理论上确定了给体?受体之间的结合距离和能量转移效率,并根据热力学参数确定了荧光酮类试剂-Mo(VI)配合物与血清白蛋白之间的作用类型。3、新颖性首次选用新颖的三甲氧基苯基荧光酮试剂,系统地研究了其与蛋白质结合的光谱条件;首次将微乳液介质引入到配合物探针中建立了目前最为灵敏的吸光光度测定蛋白质的方法;并建立了一种青霉素中蛋白质测定的快速方法;探索了微乳液和胶束中蛋白质分析的增敏机理。
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