论文部分内容阅读
目的:探讨经鼻给予碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对脑缺血后大鼠神经功能恢复以及内源性神经干细胞再生的影响。
方法:成年雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分为对照组(n=12)和bFGF组(n=12)。两组大鼠均采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型,术后第1至6 d分别经鼻给予生理盐水(每日30μl)或bFGF(每日30μl,1μg/μl)。术后第5和6 d对所有实验动物进行腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromodeoxyuridine,BrdU,50 mg/kg,细胞增殖标记物),隔8 h1次,每日2次。在术前及术后第1、7、14、21、28 d参照改良神经功能受损严重性评分(mNSS)标准,对脑缺血后大鼠神经功能恢复的程度进行评定。采用免疫组化法测定术后第7、28 d缺血侧室管膜下区(SVZ)及海马齿状回(DG)BrdU阳性细胞数;利用激光共聚焦技术观察第7 d时SVZ与DG区域的BrdU与doublecortin(DCX,未成熟神经元标记物)的双标情况;利用激光共聚焦技术观察第28 d时SVZ与DG区域的BrdU与NeuN(成熟神经元标记物)的双标情况。
结果:与对照组相比,bFGF组从术后第7 d开始就显著地促进了大鼠神经功能的恢复,显示了其明显的正性干预作用。BrdU免疫组化结果显示,术后第7、28 d,经鼻给予bFGF组在SVZ和DG区域BrdU阳性细胞数与对照组相比均有显著增高。激光共聚焦结果显示,第7 d时SVZ和DG区的大部分BrdU阳性细胞共标DCX;第28 d时SVZ仅有极少量BrdU阳性细胞共标NeuN,DG区大部分的BrdU阳性细胞共标NeuN;BrdU与DCX或NeuN的双标比率在两组间无明显差别。
结论:经鼻给予bFGF能够诱导脑缺血大鼠内源性神经干细胞增殖和存活,促进神经功能恢复。经鼻腔给予bFGF是一种有前途的治疗脑缺血的方法。