白沙蒿转录组测序、分析及内参基因的鉴定和筛选

来源 :兰州大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:yuyisea
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
白沙蒿(Artemisia sphaerocephala),菊科蒿属多年生半灌木,是中国西北荒漠区移动或半移动沙丘先锋物种,对极端环境具有良好的适应能力。此外,白沙蒿种子具有出色的营养价值,其富含脂类、多糖,是一种极具潜质的生物质能源。然而,由于基因信息的缺乏,白沙蒿相关性状形成及其对环境适应的生物学机制还不为人们所知,同时也限制了人们对其遗传资源的开发与利用。本文首次对白沙蒿进行深度转录组测序。选取内蒙古阿拉善左旗沙地自然分布的白沙蒿根、茎、叶、花、果实和实验室萌发3、7天的种子、幼苗以及高温、低温、盐、渗透胁迫(-1.7和-0.7Mpa)处理以及对照6种愈伤组织等共计17份材料,以获得最大化完整转录本。同时,为了提高实时荧光定量PCR技术对白沙蒿基因表达的准确性,基于白沙蒿转录组测序结果,选取21个候选内参基因通过RT-qPCR技术对21个候选内参基因在营养阶段、生殖阶段、种子发育阶段、胁迫处理条件下和所有样本中的表达水平进行检测,并且使用GeNorm、Norm Finder、和BestKeeper计算候选内参稳定值。得到以下几点主要结论:1.使用Illumian HiSeq 2500平台共获得46,831,604 reads(9.46Gb),用Trinity程序对高质量clean reads进行de nove组装,共产生了137,060 transcripts。对transcripts进一步组装分析,最终获得68,373 unigenes,其平均长度为692.76nt,N50长度为1161nt,其中58.7%的unigene得到能够注释。2.分析获得不饱和脂肪酸合成途径中的关键调控基因,白沙蒿中发现26个fad2、3个fad3、1个fad6和9个fad7/8,并且构建了fad2系统发育树。白沙蒿fad2基因构成了目前有报道以来植物中最大的一个fad2基因家族。3.白沙蒿转录组分析发现一系列响应极端温度、盐、干旱及复合胁迫的基因,表明白沙蒿对其生境的适应机制可能与这些基因的调控作用有关。4.综合GeNorm、Norm Finder和BestKeeper计算结果,在营养阶段:UBC9和Actin可作为最适内参基因;在生殖阶段:UBC9和PTB可作为最适内参基因;在种子发育阶段:UBC和PTB可作为最适内参基因;在胁迫处理条件下:Clathrin adaptor complex subunit和Expressed 4可作为最适内参基因;在全部样本中:UBC9和TIP41-like可作为最适内参基因。本文为白沙蒿重要性状的功能解析提供了丰富基因信息,为进一步解析白沙蒿作为先锋植物适应荒漠环境的分子机制奠定基础。不饱和脂肪酸合成途径中关键基因的发现,有助于进一步深入理解植物脂肪酸组成性状的生物学调控机制,同时,本研究为通过遗传操作改变油料作物的脂肪酸组成提供了丰富的基因资源。
其他文献
《日本国宪法》是在美国管制下制定的,因其特殊的历史背景,使之具有不同于以往宪法的特征与局限。和平宪法的反战主张起到了保障战后和平的作用,促进了日本经济迅速发展,也正
本文以3D打印技术支持的众创空间为例,论述大学生自主创业需要注意的问题,并提出相应建议。
数学活动经验是经历数学活动过程沉淀下来的,因此数学活动经验的内容应从数学活动过程角度进行梳理.基本的数学活动经验主要是:在数学化的过程、问题解决的过程和反思的过程
组织因子途径抑制物-2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)又称胎盘蛋白—5(placenta protein-5,PP-5)和基质相关丝氨酸蛋白酶抑制剂(matrix associated serine prot
目的:探讨特发性肺栓塞的临床特征,提高其诊治水平。方法:对298例肺栓塞患者进行回顾性分析,根据有无危险因素分为非特发性肺栓塞(provoked pulmonary embolism,pPE)组和特发
以丙烯酸(AC)、丙烯酰胺(AM)和二甲基二烯丙基氯化铵(DMDAAC)为原料,采用过硫酸铵/亚硫酸氢钠引发体系,在水相介质中进行共聚,探索合成产物在酸性染料染色毛织物上的固色效果。通过
<正>2012年10月30日,国家社科基金"十一五"规划(教育学)青年基金课题"课堂教学行为分析与评价的实验研究"(课题批准号:CHA070210)中期进展报告会在人民教育出版社举行。课题
目的应用荧光显微镜及新型荧光探针 H2DCF-DA检测在光源照射过程中人脐静脉血管内皮细胞(ECV 304)内活性氧的产生情况.方法将 ECV 304细胞接种于 35 mm培养皿中,24 h后加入 H
目的通过建立大鼠支气管哮喘模型,观察氯胺酮雾化吸入对哮喘模型大鼠气道高反应性和核因子-κB表达的影响。方法40只Brown Norway大鼠随机分成对照组(C组)、哮喘模型组(A组)、
我国高校考试改革,如何采取针对性措施转变考试的功能、目的与形式,是摆在所有教师与教学管理者面前的课题。本文在分析高校考试改革难点的基础上,总结现阶段高校考试改革存