基于荧光原位杂交技术的野菊核型分析

来源 :西南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:turobc
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
野菊(Chrysanthemum indicum L.)是菊科(Asteraceae)菊属重要的野生资源。目前,关于菊属植物的细胞学研究主要集中在染色体倍性、染色体分带、核型分析、减速分裂行为和染色体原位杂交等方面,其中核型分析是植物分类和遗传研究的重要手段。野菊的核型分析主要是通过传统的压片法进行染色体制片,根据其染色体的形态,大小进行配对分组分析核型,该种方法难以精确识别全部的染色体,对染色体相似度较高的物种的核型分析更是困难。而荧光原位杂交技术依据碱基互补原理,能够准确定位特殊修饰的核苷酸分子探针在染色体上的位置,可以为核型分析提供更多的可识别的标记。在菊属植物中,利用荧光原位杂交技术进行核型分析的研究较少,一方面是因为荧光原位杂交技术对染色体制片的质量要求较高,另一方面是因为缺少好的标记探针以及开发标记的方法。基于此,本研究在优化野菊制片方法的基础上,通过基因组测序的方法从野菊基因组中挖掘重复序列,开发标记探针,建立了适于野菊的荧光原位杂交体系,初步分析了玉米45S r DNA、5S r DNA和重复序列YJ223-5在野菊中期染色体上的分布特点,并根据三个探针的荧光原位杂交结果分析了野菊的核型。主要研究结果如下:1、采用扦插和组培两种不同的生根方式,解决了野菊秋冬季根尖获取困难的问题。并针对不同的取材,对制片过程进行调整,均获得了分散程度高、清晰度好的染色体制片。2、对去壁低渗火焰干燥制片进行调整,筛选最佳预处理条件和酶解时间,综合得到最佳制片体系为:8-羟基喹啉处理3h或冰水处理16小时,混合酶液(纤维素酶:果胶酶=2:1)酶解90~100min。3、利用流式细胞仪对野菊基因组大小进行估算,得到四倍体野菊基因组大小约为6.36Gb。4、对野菊进行基因组测序,得到6Gb的测序数据,用基于图形聚类的方法对重复序列进行分类并进行注释。结果显示四倍体野菊重复序列约占总基因的68.61%,其中42.31%为散在重复序列,26.3%为串联重复序列。5、玉米45S rDNA探针在野菊中期染色体上有9个信号点,分布在3号、6号、8号染色体的末端,5S r DNA探针在野菊中期染色体上有3个信号点,分布在4号染色体的亚末端,YJ223-5探针在野菊中期染色体上有8个信号点,分布在2号、4号、8号染色体的末端,其中有两条染色体的末端都有信号。根据信号位点的数目和分布位置,并结合染色体核型参数,分析了野菊的核型,得到野菊的核型公式为2n=4x=36=24m(2SAT)+12sm,属于2A核型,在系统进化中属于较为原始的种。
其他文献
目前,市政债券的发行在地方基本是一片空白,同时各地的存款又相对较多,为了加大基础设施的融资力度,加快地方经济的发展,本文从市政债券的融资基础入手,通过对国外及国内情况的分析
目的观察白藜芦醇(RSV)对Lieber-De Carli酒精液体饲料诱导的小鼠酒精性脂肪肝的作用,并初步探讨其可能的相关分子机制。方法 6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为6组:正常对照
程福蒙、王宗湖在《上海教育科研》2006年第11期上撰文认为,考察历史上的课程改革,我们发现它们很难达成理想目标。为何课程改革不易成功?其主要原因主要有:第一,事主者的异动与心
国有企业改制是我国经济体制改革的一项重要内容。十六届三中全会通过的《中共中央关于完善社会主义市场经济体制若干问题的决定》中明确提出:“进一步增强公有制经济的活力,大
报纸
以芦荟原汁、糯米、酿酒干酵母、醋酸菌为原料,通过单因素实验和正交试验,探索了芦荟糯米醋的发酵工艺。通过正交试验确定了最佳组合为酵母活化液接种量为1.0%(V/V)、糯米与
哈萨克斯坦是2007年第一批遭受次贷危机较为严重的国家之一。本文简要分析了哈国银行业的发展历程、现状和脆弱性,次贷危机对哈国金融和银行业的冲击,以及哈国政府采取的应对措
福建教育系统将编制完善政务公开的详细目录,并将通过各级地方媒体向社会公开,其中福建省教育厅的公开目录将通过“中国福建”门户网站向社会公开。福建公开的教育热点难点主要
海绵城市的建设可有效缓解城市雨水洪涝现象。为科学有效地评价海绵城市建设的现状,提高海绵城市建设的绩效水平,构建了包括水生态、水环境、水资源、水安全、建设制度及执行
在我国社会经济的迅速发展下,人们的生活质量得到了很大的提升,进而对民用建筑的消防设计也提出了更为严格的要求,由于仅几年来火灾现象的普遍发生,为人们带来了严重的经济损失和
随着市场经济的迅速发展和社会结构转型的加速,非政府组织的大量涌现是一种必然的现象。非政府组织所具有的功能作用,与统战工作职能有相一致的地方。要进一步深化对非政府组织