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目的：检测膜联蛋白Annexin A1(ANXA1)蛋白在食管鳞癌患者血清和癌组织中的表达,研究其表达水平与食管癌放化疗敏感性、转移和预后的关系。检测放化疗前后miRNA196a、ANXA1表达的变化,研究在体内miRNA1 96a对ANXA1的表达调控作用。通过细胞培养转染ANXA1质粒以及miRNA196a后检测细胞增殖及迁移、侵袭能力,探讨在体外miRNA196a调控ANXA1表达并影响食管癌侵袭与转移的机制。方法：1.组织芯片试验：收集食管鳞癌手术后的病理标本,从蜡块中获得组织芯片,利用免疫组化染色测定食管鳞癌组织标本中ANXA1的表达水平,并与患者的临床病理参数和随访资料进行相关性分析。2.临床试验：接受放化疗的非手术食管鳞癌46例患者,采集其治疗前后的外周静脉血清,测定ANXA1的蛋白水平和miRNA196a的表达水平。将血清ANXA1表达情况与患者的临床病理参数和随访资料进行相关性分析,探讨血清ANXA1与食管癌转移和预后的关系；并研究体内miRNA196a对ANXA1表达的调控作用。3.细胞培养试验：体外培养食管鳞癌细胞株(Eca109),构建ANXA1表达质粒(pCMV5-myc-ANXA1),将ANXA1质粒和miRNA196a-mimic/inhibitor转染进Eca109细胞,检测在体外miRNA196a对ANXA1表达的影响,利用MTT实验、Transwell实验分别检测细胞存活率以及细胞迁移、侵袭能力,观察miRNA196a调控ANXA1表达对细胞增殖和侵袭转移的影响。并通过蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测食管癌细胞中转移相关蛋白Snail和E-cadherin的表达。结果：1.免疫组化染色结果表明食管鳞癌组织中的ANXA1表达降低,胞浆和胞核中的表达水平均显著低于癌旁鳞状上皮组织。食管鳞癌组织中胞核ANXA1表达水平与大体分型显著相关,而与其他临床病理参数无关。2.食管鳞癌细胞核ANXA1表达与预后相关,胞核ANXA1低表达者比高表达者预后好。3.食管鳞癌患者血清中的ANXA1表达水平低于健康人群的血清水平,但经过放化疗后血清中ANXA1表达水平明显上调。4.食管鳞癌患者治疗前血清ANXA1基线水平与放化疗敏感性和预后无相关。治疗前血清ANXA1水平高的食管鳞癌患者1年PFS较差,但差异无统计学意义；而治疗后ANXA1表达上调幅度与1年PFS相关,上调越显著者复发和转移几率越高,差异有统计学意义。5.食管鳞癌患者血清中的miRNA196a水平在放化疗后表达显著下调,miRNA196a与ANXA1的表达在治疗前后呈相反的变化趋势。6. pCMV5-ANXA1表达质粒构建成功,将ANXA1转染进入食管癌细胞中后能够表达。转染ANXA1后食管鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著高于空载组的食管癌细胞。7.转染miRNA196a-mimic后食管鳞癌细胞miRNA196a表达上调而ANXA1表达下调,转染miRNA 196a-inhibitor后ANXA1表达上调。转染miRNA196a-mimic后食管鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭生长能力显著降低,共转染ANXA1可以逆转这种抑制作用。8.转染ANXA1可促进食管鳞癌细胞中Snail表达而抑制E-cadherin表达,而转染miRNA196a-mimic的结果恰恰相反。结论：1.相对于健康人群血清或是癌旁正常上皮,食管鳞癌患者血清和食管鳞癌组织中的ANXA1表达均降低。但是血清ANXA1表达在放化疗后显著上调。2.食管鳞癌细胞核ANXA1表达水平与预后相关,胞核ANXA1表达越低则预后越好。食管鳞癌患者治疗后血清ANXA1上调程度与预后相关,上调越明显者预后越差。3.在食管鳞癌患者体内ANXA1表达受到miRNA196a负向调控，ANXA1可能是miRNA196a的靶基因。4.体外实验显示ANXA1能促进食管鳞癌细胞的增殖,并通过Snail、E-cadherin途径促进侵袭转移,这是ANXA1高表达患者易于转移和预后差的分子基础。5.体外实验证实ANXA1是miRNA196a的靶基因,miRNA196a可抑制食管鳞癌中ANXA1的表达并抑制细胞增殖；过表达miRNA196a能通过促进E-cadherin进而抑制食管癌侵袭和转移。