感音神经性聋与耳鸣、眩晕被认为是耳科学三大难治性疾病,且发病率呈增加趋势,严重影响着患者的生活质量。通过内耳局部给药对于内耳疾病的治疗较传统的全身给药具有显著优势,但在内耳局部给药中,药物传递系统的粒径、表面化学等性质影响着内耳药物分布,而且递药系统也可能引起耳蜗病变。本文通过对不同特性的纳米载药系统体内外生物相容性与摄取转运机制的研究,系统地比较了不同特性的纳米载药系统在内耳给药的体内外行为,期望能为纳米载药系统在内耳疾病治疗中的应用提供参考与借鉴。以乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒(PLGA NPs)为模型,研究了不同粒径的纳米载药系统应用于内耳给药的体内外摄取与分布行为。体外细胞毒性和摄取实验研究结果表明,粒径分别为<100 nm、100~200 nm和200~400 nm的PLGA NPs,对L929均无明显细胞毒性,且都能被细胞摄取,分布于细胞核周围;对其进行定量分析发现中间粒径的摄取量最大,其次是小粒径,再次是大粒径,其细胞摄取率依次为99.5%、97.6%、71.9%。体内组织相容性和分布实验结果显示,不同粒径的PLGA NPs均表现出较好的生物相容性,且能转运至内耳并分布到耳蜗各个组织中,其中中间粒径的纳米粒分布量最大。对中间粒径的PLGA NPs进行不同的表面修饰,制备得到泊洛萨姆407修饰的PLGA NPs(P407-PLGA NPs)、壳聚糖修饰的PLGA NPs(CS-PLGA NPs)和单氧基聚乙二醇修饰的PLGA NPs(mPEG-PLGA NPs),并对未经修饰的和表面修饰的PLGA NPs应用于内耳给药的体内外摄取与分布规律进行了系统地比较。研究发现,未经修饰的和不同表面修饰的PLGA NPs对L929细胞和HEI-OC1细胞均表现出良好的生物相容性,且都能被两种细胞摄取,其中P407-PLGA NPs较其他纳米粒在两种细胞中均有最大摄取率(L929:96.1%;HEI-OC1:91.4%)。体内实验也证明未经修饰的和不同表面修饰的PLGA NPs均具有良好的生物相容性,经局部给药过后均能转运进入耳蜗;且经表面修饰的比未经修饰的PLGA NPs分布量更大,其中P407-PLGA NPs分布量最高。在耳蜗各组织分布结果表明,未经修饰的和表面修饰的PLGA NPs均能转运分布至耳蜗各个组织,并且经表面修饰的PLGA NPs均能进入到内耳外毛细胞中,尤其是P407-PLGA NPs,荧光半定量分析结果表明其在内耳外毛细胞中分布量分别为未经修饰的和经CS、mPEG修饰的PLGA NPs的1.95、1.76、1.39倍(P<0.001)。以壳聚糖纳米粒(CS NPs)为模型,研究了不同金属离子配合CS NPs应用于内耳给药的体内外毒性与摄取分布规律,分别为未经金属离子配合的CS NPs、铜离子配合的CS NPs(Cu-CS NPs)、钙离子配合的CS NPs(Ca-CS NPs)、锌离子配合的CS NPs(Zn-CS NPs)和铁离子配合的CS NPs(Fe-CS NPs)。体外细胞毒性实验结果表明,未经修饰的和金属离子配合的CS NPs在低浓度中(﹤50μg/mL)均表现出良好的生物相容性,随着浓度加大,毒性增加。体外细胞摄取实验结果显示,对于L929细胞,未经修饰的和金属离子配合的CS NPs(除Fe-CS NPs)均有较大摄取量,摄取率达90%以上;对于HEI-OC1细胞,未经修饰的和不同金属离子配合CS NPs均能被其摄取,且未经修饰的CS NPs和Zn-CS NPs较其他纳米粒均有更高摄取量。体内动物实验结果表明,未经修饰的和金属离子配合的CS NPs(除Ca-CS NPs)均表现出较好的生物相容性,且均能分布到耳蜗各组织。综上所述,本研究结果表明,纳米载药系统的不同特性影响其体内外生物相容性和摄取分布行为,通过调整纳米载药系统的特性,有利于获得更优的载药系统。对于PLGA纳米系统应用于内耳给药,调整粒径范围在100~200 nm更有利于其细胞摄取,并且,通过对其表面修饰,尤其是亲水性分子P407进行修饰,能显著提高其在体内外的摄取与分布。对于CS纳米系统应用于内耳给药,通过不同金属离子配合将影响其生物相容性及其摄取分布行为,为其处方设计优化提供参考与借鉴。