松江鲈(Trachidermus fasciatus)是一种降海洄游性鱼类。历史上松江鲈广泛分布在我国沿海地区,但因近几十年来各种环境污染严重,1988年已被列为国家Ⅱ级保护水生野生动物。人工养殖成为恢复其自然种群的重要途径,然而,面对养殖过程中日益频发的病害问题,从松江鲈自身的免疫机制入手,寻求松江鲈疾病防治的有效手段成为当务之急。C型凝集素是一类钙依赖型糖结合蛋白,它们在先天免疫中作为模式识别受体发挥作用,并具有其他多种功能。为了更深入的了解C型凝集素在松江鲈中的功能,我们对松江鲈两种膜型C型凝集素进行了表达与功能研究。利用EST和SMART技术克隆获得基因的cDNA全长,利用荧光定量PCR技术分析其在mRNA水平上的组织分布和病原体刺激后免疫相关组织的表达模式；同时构建原核表达载体,诱导获得重组蛋白研究其蛋白活性,推测蛋白功能。TfCD209的cDNA序列全长1042 bp,其中5’非编码区(5’UTR)为256 bp,有一个G的帽子结构；3’非编码区(3’UTR)为15 bp；开放阅读框(ORF)为771 bp,编码256个氨基酸。蛋白序列预测蛋白分子量(MW)为29078.7,理论等电点(pI)为5.45。结构域预测,TfCD209分子包括一个跨膜区和一个CTLD结构域,在CTLD结构域中有EPN甘露糖结合位点、WIGL保守序列和四个保守的半胱氨酸。二级结构含有2个α螺旋和5个p折叠；Neighbor-joining方法构建进化树显示,所有鱼类的CD209聚为一大支,其他脊椎动物CD209聚为一支,符合进化规律。qRT-PCR结果显示TfCD209广泛表达于松江鲈的各组织器官,但存在一定的组织差异性,其中在肝脏中的表达量最高。经鳗弧菌(Vibrio anguillarum)刺激后,松江鲈肝脏、鳃、皮肤和脾脏中的TfCD209在刺激后在不同的时间点都上调表达。TfCD209重组蛋白在不依赖钙离子的情况下可以结合多种细菌。因此,推测TfCD209在松江鲈体内可能做为模式识别受体参与机体免疫反应。TfCD302的cDNA序列全长2195 bp,其中5’非编码区(5’UTR)为62 bp；3’非编码区(3’UTR)为1448 bp；开放阅读框(ORF)为735 bp,编码244个氨基酸。蛋白序列预测蛋白分子量(MW)为27165.8,理论等电点(pI)为4.69。SMART结构域预测,其蛋白N端有信号肽,其后紧接着一个CTLD结构域,C端有跨膜区。CTLD结构域中不含有糖结合位点,四个保守的半胱氨酸依然保守。二级结构含有2个α螺旋和5个β折叠；Neighbor-joining方法构建进化树显示,松江鲈TfCD302与斑马宫丽鱼(Maylandia zebra)等鱼类聚为一支,其他脊椎动物CD302聚为一支,符合进化规律。qRT-PC结果显示TfCD302广泛表达于松江鲈的各组织器官,在头肾中的表达量最高。经鳗弧菌刺激后,在松江鲈肝脏、鳃、皮肤和脾脏中的TfCD302均上调表达。TfCD302重组蛋白在不依赖钙离子的情况下可以结合多种细菌。因此,推测]TfCD302在松江鲈体内可能做为模式识别受体参与机体免疫反应。