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肝细胞癌(简称肝癌,Hepatocellular Carcinoma,HCC)是我国最常见的高发肿瘤之一,具有难以早期发现、血行转移早、复发率高、预后差等特点,其发生、发展、转移是由体内多基因参与、多步骤协同的复杂过程。目前,尽管已经鉴定了一些肝癌的抑癌基因,如p53 和p16 等,并明确了它们在肝癌中的特异性失活,但是在肝癌发生中特异性激活的癌基因却少见报道。Gankyrin基因(Gann ankyrin repeated gene)是新近克隆的一个在肝癌中高表达的癌基因,其致癌性可能与其的表达产物Gankyrin 蛋白通过高磷酸化并降解抑癌蛋白Rb,致使Rb 蛋白失活,进而促使细胞由G1 期向S 期转化有关。Gankyrin 蛋白在肝癌中呈阳性表达,并随肝癌的进展其表达越来越强。虽然近年来在肝癌的治疗方面取得了许多进展,但外科手术切除和肝移植仍然是最有效的手段,尽管实施了根治性的切除术或肝移植,由于不能检测到的外周血中的微转移,很多病人仍死于肝癌术后的复发或转移。近年来,利用分子生物学的方法来检测远处器官、外周血中孤立的肿瘤细胞或微转移已经为研究肝癌转移的生物学行为开辟了新的途径。利用高敏感性的巢氏RT-PCR 方法检测外周血中的孤立的肿瘤细胞可能有助于提高微转移检测的敏感性和特异性。目的: 1、检测Gankyrin 蛋白(Gann ankyrin repeated protein)在Wistar 大鼠肝细胞癌发生、发展不同阶段中的表达。2、检测Rb 蛋白(Retinoblastoma protein)在Wistar 大鼠肝细胞癌发生、发展不同阶段中的表达。3、探讨Gankyrin 蛋白和Rb 蛋白在Wistar大鼠肝细胞癌发生、发展中的相互关系。4、探讨在Wistar 大鼠肝细胞癌形成过程中外周血中循环肿瘤细胞表达与Gankyrin 蛋白和Rb 蛋白的关系,检测微转移的敏感性和特异性及其对于预测其复发、转移的意义。方法: 应用二乙基亚硝胺(DEN)诱导Wistar 大鼠肝细胞癌,MRI 动态扫描大鼠肝脏成瘤情况,并分别在诱导第16、18、20、22、25 周处死大鼠。留取肝脏标本动态观察病理变化,免疫组化法动态检测大鼠肝细胞癌形成过程中Gankyrin 蛋白、Rb 蛋白的表