拟南芥新疆生态型体细胞胚胎发育的细胞学及理化特性研究

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拟南芥是十字花科拟南芥属植物,全球均有分布。具有形体小、生活史短、种子多、基因组少等独特的生物学特征,为植物遗传学、发育生物学和分子生物学的模式植物。 本文主要研究了拟南芥体细胞胚胎发生与发育过程及其诱导条件、胚性细胞中淀粉积累规律、体胚发生过程中过氧化物酶同工酶和酯酶同工酶酶谱特征。通过对这些表观遗传特征的研究,探讨拟南芥新疆生态型体胚发生的基本特征和生理表现,为综合评估拟南芥新疆生态型的遗传价值提供资料,主要研究内容和结果如下: 1.拟南芥新疆生态型体细胞胚胎发生的诱导使用MB基本培养基的效果最好,外植体采用无菌的叶柄和真叶,只用NAA或者6-BA的培养基无法诱导出愈伤组织,高浓度的2,4-D利于愈伤组织的诱导,而组合MS+6-BA(0.1mg/L)+NAA(1.0 mg/L)+2,4-D(1.0 mg/L)为最佳胚性愈伤组织诱导培养基。组合KT(1.0mg/L)+2,4-D(0.2 mg/L)为成胚诱导培养基,可诱导得到人量的体细胞胚。 2.拟南芥新疆生态型体胚的发生与大多双子叶植物的体胚发生一样经历单细胞,多细胞胚,球形胚,心形胚到子叶胚及成熟胚的发育过程。 3.淀粉粒在体细胞胚形成过程中有两个积累高峰,第一次出现在胚性愈伤细胞形成时期,第二次在球形胚形成时期,与体细胞的发生发育有一定的消长关系。 4.DNA合成高峰期在蛋白质合成高峰期之前,胚性和非胚性愈伤组织的DNA和蛋白质含量有不同之处。 5.POD活性变化及POD同工酶谱带都与体胚的形成有关。POD同工酶的活性及酶谱的变化可以作为拟南芥新疆生态型愈伤组织体细胞胚发生的灵敏标记。 6.EST同工酶图谱中,虽然酶谱带没有多大变化,但其活性的变化比较明显,EST同工酶与体胚的形成有关。
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