维生素E琥珀酸酯诱导乳腺癌细胞凋亡的实验研究

来源 :第二军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fq1984
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目的 维生素E琥珀酸酯(Vitamin E succinate,VES;a-tocopherylSuccinate,a-TOS)是一种维生素E的衍生物,研究证实,VES对恶性肿瘤如B淋巴瘤、前列腺癌、子宫内皮细胞癌、胃癌和结肠癌等都具有显著的凋亡诱导作用,而对机体正常细胞无毒性。本研究旨在观察VES对乳腺癌MCF-7(雌激素受体阳性)和MDA-MB-435(雌激素受体阴性)细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,并分析VES调控Fas蛋白的表达在凋亡诱导过程中的作用。 方法 人乳腺癌细胞株MCF-7(雌激素受体阳性)以及人乳腺癌细胞株MDA-MB-435(雌激素受体阴性)以RPMI 1640培养基孵育,至对数生长期时,分别以VES刺激12h,24h和48h,VES浓度为5μg/ml,10μg/ml和20μg/ml,用MTF法测定VES对细胞的增殖抑制作用;VES处理结束后,收集细胞制成单细胞悬液,加入碘化丙叮(PI)后以流式细胞仪分析细胞周期并计算凋亡率的变化。为检测Fas分子在VES诱导乳腺癌细胞凋亡过程中的作用,以Fas中和性抗体进行阻断实验。为检测VES作用后Fas蛋白水平的变化,以5μg/ml,10μg/ml和20μg/ml VES处理乳腺癌细胞48h后,裂解乳腺癌细胞后收集蛋白并进行定量分析,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白后以半干式电转移将蛋白转移到硝酸纤维素膜上,以Western蛋白印迹法检测Fas
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