生物大分子的干燥加热硫酸化及其抗凝血活性的研究

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本文在硫酸氢盐存在时,干燥加热条件下首次把丝素蛋白、聚葡萄糖进行硫酸化,并研究硫酸化丝素蛋白、聚葡萄糖的抗凝血活性。   首先,本文从废蚕茧中分离提取可溶性丝素蛋白,然后在硫酸氧盐存在时对丝素蛋白进行干燥加热硫酸化,得到硫酸化的最优条件是pH1.4、6 d、85℃,此时硫酸化丝素蛋白的硫酸根含量为4.49%。IR结果显示了在硫酸氢盐的存在时干燥加热条件下硫酸化反应成功发生,1H-NMR结果表明了硫酸化反应发生在丝素蛋白中的丝氨酸残基上的羟基,凝胶渗透HPLC表明了发生硫酸化后丝素蛋白的分子量因为发生了硫酸化反应而下降。氨基酸组成分析表明丝素蛋白中主要氨基酸的含量下降了,其他的氨基酸的含量相对的提高了,氨基酸序列的基本结构(Gly-Ala-Gly-Ala-Gly-Ser)并没有发生根本的变化,说明了干燥加热的方法是不会破坏丝素蛋白基本结构。然后对硫酸化丝素蛋白进行了抗凝血活性的研究。结果发现硫酸化的丝素蛋白可以延长凝血时间、APTT、PT。其次,本文又对聚葡萄糖进行了干燥加热硫酸化,得到了硫酸化聚葡萄糖的最优条件是pH1.4、2 d、50℃,此时硫酸化聚葡萄糖的硫酸根含量为9.34%。IR结果显示了在硫酸氢盐的存在时干燥加热条件下可成功引入硫酸根基团。对硫酸化聚葡萄糖进行了抗凝血活性的研究,结果发现了硫酸化后的聚葡萄糖全血凝固时间延长了。硫酸化丝素蛋白和硫酸化聚葡萄糖的抗凝血活性和被引入的硫酸根的多少有密切关系。   综述所述,在硫酸氢盐存在时,在干燥加热的条件下,丝素蛋白和聚葡萄糖可以被成功的硫酸化,且硫酸化后的丝素蛋白和聚葡萄糖具有了抗凝血活性。证明了干燥加热硫酸化对丝素蛋白和聚葡萄糖是一种很有效的方法。
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