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目的:检测全身性seipin基因敲除对小鼠认知功能和抑郁样行为的影响,以及seipin敲除对海马神经发生的影响,并探索其发生机制。方法:1.繁殖全身性seipin基因敲除小鼠(systemic seipin knockout,seipin-sKO),剪鼠尾提取DNA,使用半定量PCR鉴定小鼠基因型。2.选取不同年龄段(5周、8周、12周、18周)的WT和seipin-sKO小鼠,通过检测小鼠在Y迷宫自发交替的正确率和Morris水迷宫在目标象限的停留时间分析seipin敲除对小鼠空间记忆能力的影响,通过检测强迫游泳和悬尾实验中小鼠的不动时间,分析seipin敲除对小鼠抑郁样行为的影响。3.选取不同年龄段(5周、18周)的WT和seipin-sKO小鼠海马组织切片,通过Ki67和DCX免疫荧光染色检测seipin敲除对小鼠海马神经发生的影响。4.分离培养新生(Postnatal day 0,P0)WT和seipin-sKO小鼠海马的NSCs,通过BrdU掺入实验和Tuj1免疫荧光染色检测seipin敲除对P0小鼠海马NSCs增殖和分化能力的影响。5.检测不同年龄段(5周、8周、12周、18周)WT和seipin-sKO小鼠的血糖水平。运用Pearson相关系数分析小鼠血糖与认知指标的相关性。结果:1.检测不同年龄WT和seipin-sKO小鼠的空间记忆能力。Y迷宫结果显示,12周和18周seipin-sKO小鼠的自发交替正确率均较WT小鼠明显下降(P<0.05);Morris水迷宫结果显示与WT小鼠相比,12周、18周seipin-sKO小鼠登上平台的潜伏期明显延长,且在原平台所在象限的停留时间和游程都明显减少(P<0.05),但5周和8周seipin-sKO小鼠均未出现差异,提示seipin敲除导致小鼠从12周开始出现认知功能障碍。2.检测不同年龄WT和seipin-sKO小鼠的抑郁样行为。在强迫游泳(forced swimming test,FST)中,12周、18周seipin-sKO小鼠的不动时间明显较WT组长(P<0.05)。悬尾实验(tail suspension test,TST)结果显示,18周seipin-sKO小鼠不动时间也高于WT小鼠(P<0.05),提示seipin敲除导致18周龄小鼠出现抑郁样行为。3.免疫荧光染色检测seipin缺失对小鼠海马齿状回颗粒下层(SGZ)神经发生的影响。结果显示18周seipin-sKO小鼠海马SGZ增殖标记物Ki67和早期神经元标志物DCX的阳性细胞数均明显低于WT小鼠,且有统计学意义(P<0.05),但5周seipin-sKO小鼠与WT相比并无差异,提示seipin敲除导致18周龄小鼠海马SGZ神经发生水平降低。4.体外分离培养P0小鼠海马NSCs,免疫荧光染色比较P0 WT和seipin-sKO小鼠海马NSCs增殖和分化能力。结果显示seipin-sKO组BrdU和Tuj1阳性细胞率与WT相比无明显差异,提示seipin敲除不影响P0小鼠海马NSCs的增殖和分化能力。5.检测不同年龄WT和seipin-sKO小鼠的血糖水平,结果显示seipin-sKO小鼠在12周(P<0.05)和18周(P<0.01)血糖水平都明显高于WT小鼠。且Pearson相关系数分析结果显示,18周龄小鼠血糖水平分别与Y迷宫自发交替正确率(R=-0.5462,P=0.013)、Morris水迷宫在目标象限停留时间(R=-0.4614,P=0.041)以及在目标象限停留游程(R=-0.4522,P=0.045)均呈负相关。提示seipin敲除引起的代谢紊乱可能是影响认知功能的原因。结论:1.全身性seipin基因敲除小鼠在18周龄表现出海马NSCs增殖分化能力下降并伴有认知功能障碍和抑郁样行为,而体外培养P0 seipin敲除小鼠海马NSCs的增殖和分化能力没有变化,因此seipin敲除小鼠海马神经发生障碍可能不是由于seipin基因缺失导致的。2.随年龄增长,全身性seipin基因敲除小鼠血糖逐渐升高,统计分析显示血糖与seipin小鼠认知学习能力负相关,因此我们推测seipin敲除引起的代谢紊乱可能是导致小鼠认知障碍的重要原因。