过去,便携式血糖仪只是单纯地被糖尿病患者用来检测血液中葡萄糖浓度,最近的研究发现,通过蔗糖转化酶的纽带作用,便携式血糖仪同样可被用于检测一些非葡萄糖目标物。本文通过便携式血糖仪检测技术为检测生物小分子提供了新的检测手段和思路,主要内容包括以下三个方面:1、基于DNA适体传感血糖仪测定多巴胺的研究。将多巴胺适体序列DNA1固定在金纳米粒子修饰的96孔板表面,再将适体互补序列DNA2和蔗糖转化酶修饰金纳米粒子制备的信号探针通过杂交反应固定在DNA1和金纳米粒子修饰的96孔板表面,构成多巴胺适体传感器。当有目标物多巴胺存在时,多巴胺与适体DNA1相互作用,释放出信号探针,释放出的信号探针与蔗糖反应生成葡萄糖,通过便携式血糖仪检测生成的葡萄糖浓度可以实现对多巴胺的测定。本方法检测的多巴胺浓度线性范围为0.08-100μmol/L,检测限为0.03μmol/L,且成功应用于人体血清中多巴胺浓度的测定。2、基于肽特异性切割血糖仪高灵敏度测定前列腺特异性抗原的研究。以金纳米粒子修饰96孔板作为反应平台,生物素修饰的肽作为识别元素,蔗糖转化酶修饰的链霉亲和素包被磁珠作为探针,以血糖仪作为检测仪器实现了高灵敏度测定前列腺特异性抗原的测定。本方法检测前列腺特异性抗原浓度在80pg/mL到7 ng/mL范围内呈现良好的线性,检测限为30 pg/mL。本方法被成功应用于人体尿样中前列腺特异性抗原浓度的测定。3、利用血糖仪和适体识别技术检测沙门氏菌的研究。首先,将沙门氏菌适体固定在96孔板微孔中,以转化酶修饰的适体互补序列为探针,通过DNA杂交作用,将探针固定在96孔板微孔中。当有目标物沙门氏菌存在时,沙门氏菌与沙门氏菌适体发生识别作用,使转化酶修饰的适体互补序列探针脱落,然后将脱落的探针溶液中加入果糖,在探针上转化酶的作用下,将果糖转化为葡萄糖,利用葡萄糖仪为检测仪器,实现对沙门氏菌的测定。方法的检测限为320CFU/mL,另外,该方法对沙门氏菌的测定表现出了良好的选择性。此外,本文还在化学发光和DNA生物传感器的基础上做了以下两项工作:4、基于杂交链式反应信号放大技术测定赤霉素的研究。以磁珠为载体,以抗体和DNA1修饰金纳米粒子作为探针,通过杂交链式反应信号放大技术实现对赤霉素的化学发光免疫测定。当目标物赤霉素存在时,赤霉素与抗体修饰的磁珠、抗体和DNA1修饰的金纳米探针形成三明治夹心免疫复合物,加入富含G碱基的发卡H1和H2后,探针上的DNA1诱导H1和H2发生杂交链式反应,在磁珠上形成双链DNA结构,然后,双链DNA结构中的G碱基在3,4,5-三甲氧基苯甲酰甲醛的作用下,瞬间的释放光能产生化学发光,根据化学发光强度实现对赤霉素的测定。在最优条件下,本方法检测赤霉素的线性范围为0.01ng/mL到70 ng/mL,检测限是0.003 ng/mL。方法表现出良好的重现性和选择性。5、基于磁珠和DNA酶催化反应化学发光法检测L-组氨酸的研究。以化学发光试剂标记的L-组氨酸特异性识别序列的底物链作为信号探针;根据底物链序列设计DNA酶序列,并利用其修饰羧基化磁珠,通过碱基互补配对原理将信号探针固定在磁珠上,当有目标物L-组氨酸存在时,标记了化学发光试剂的底物链被催化剪切成两个片段,这两个片段从磁珠表面脱落,将脱落的DNA片段分离后,利用流动注射化学发光法进行检测,根据化学发光强度的实现对L-组氨酸的测定。L-组氨酸浓度在1.0到1000 nmol/L范围内呈现良好的线性,检测限为0.3 nmol/L。本方法成功应用于人体尿样和血清中L-组氨酸浓度的测定,且表现出良好的选择性。