石油是近代社会飞速发展的强大动力。石油泄漏将导致土壤污染、农业粮食减产,石油中某些致畸致癌组分进入人体,危害人体健康。石油污染已成为制约经济发展和社会进步的课题。微生物修复法具有成本低廉、操作简单、无二次污染等优点,成为土壤修复最具潜力方法之一。以石油降解细菌(10-1、10-2、10-3、10-4)为研究对象,构建出一组高效石油降解菌群10#,分别以游离态和固定化菌剂形式,投加到室内模拟石油污染土壤中,比较两种菌剂类型对石油污染土壤的修复效果,得到以下研究结果：菌株生长曲线实验表明,在牛肉膏蛋白胨培养液中,各菌株能耐受5%环境盐度,最佳初始pH为7,在30 ℃、180r/min条件下振荡培养14 h,制备一级种子液；在以石油为唯一碳源的无机盐培养基中,菌株10-1、10-2、10-3的生长趋势较为一致,表现出同步性。将各菌株接种于石油降解培养液中,以菌株间协同作用为参考基准,用排列组合的方式构建出高效石油降解菌群10“,该降解菌群由各菌株一级种子液等体积比混合,以二氯甲烷(DCM)为萃取剂,利用紫外分光光度法测得其对石油的降解率可达73.34%,同等条件下比单菌株对石油最高降解率提高了25.18%。模拟石油污染土壤微生物修复试验表明,固、液菌最佳接种量均为10%；土壤最佳C、N、P之比为100：10：1；石油降解率分别为32.5%和24.9%,对照组仅为8.8%。土壤修复过程中相关指标检测结果显示,土壤pH逐渐降低,固菌组土壤pH下降趋势大于游离菌组,且都大于对照组；土壤脱氢酶活性呈上升趋势,固菌组在修复进行第45 d最高,可达17.27 μgTF/g干土/d,游离菌组在第30 d最高,为14.83gg TF/g干土/d,对照组土壤中脱氢酶活性亦有一定程度的增强,在第60 d达到最高,为10.67μg TF/g干土/d；土壤呼吸强度随时间均呈上升趋势,投加固定化菌的试验土壤在修复第60 d的呼吸强度达到最高,为2.26 mg CO2/g干土/h,投加游离菌组土壤的最高呼吸强度在第50 d,为1.79 mg CO2/g干土/h,两者均大于最高呼吸强度的自然土壤1.42mg CO2/g干土/h及对照组土壤最高呼吸强度1.06mg CO2/g干土/h；通过GC-MS分析石油组分降解前后变化情况表明,该石油降解菌群,对C14-C32中大部分正构烷烃具有良好的降解效果,说明该菌群具有比较宽的降解谱。建立10#混合菌群修复石油污染土壤的模型参数：土壤中石油浓度6645.7 mg/kg,含水率15%-20%,初始pH 7.25左右,营养盐比例C：N：P=100：10：1,石油降解菌接种量10%。室外石油污染土壤生物修复的试验验证表明,经过40 d的修复,固菌试验组石油降解率为26.3%,游离菌石油降解率为19.2%,未添加任何菌剂的对照组土壤中的石油降解率仅为5.9%。10“石油降解菌群,在对石油污染土壤的实际应用中可加速石油类污染物的降解,具有一定的修复能力。