鸡源性益生芽孢杆菌的筛选鉴定、固体发酵的优化及其应用效果的研究

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芽胞杆菌能以菌体和芽孢两种形式存在,其芽孢能够耐受高温、酸碱以及机械挤压等作用,因此与其它形式的微生态制剂相比芽孢杆菌微生态制剂具有众多的优势,是优良的微生态制剂菌种。本文从健康土鸡盲肠中分离获得98株耐热芽孢杆菌,依次以菌株产蛋白酶、产淀粉酶、产纤维素酶能力为初筛标准,以菌株对酸碱盐的耐受性及对病原菌生长的抑制为复筛标准,筛选出具有益生潜力的Y31菌株;研究了Y31菌株对常见兽用抗生素的药物敏感性,分析了其对高铜、温度、pH等的耐受性;对Y31进行了16S rDNA分子鉴定,将Y31初步鉴定为枯草芽孢杆菌。采用单因子试验研究了Y31生长繁殖的最适碳源氮源,用Placke-Burman试验设计、爬坡试验及响应面分析法优化培养基中的其他组成成份,确定了适合芽孢杆菌固体发酵的培养基组成:按麸皮:豆粕为6:1的比例配置成固体基质,在此基础上添加0.001%硫酸锰,0.02%硫酸镁,0.24%葡萄糖,0.15%硫酸铵,10.29%玉米粉;采用单因素试验优化了固体发酵条件:发酵温度37℃,装料量40g/250mL,料水比1:0.8,接种量10%(v/w),发酵时间56 h。在优化后的培养基和发酵条件下,枯草杆菌Y31的产芽孢量为17.01×109CFU/g,用60℃,24 h烘干后,每克发酵产物的活菌数为24.31×109CFU/g。对自行研制的枯草杆菌微生态制剂Y31和LBS53进行AA白羽肉仔鸡喂养试验。通过检测肉鸡生产性能、成活率、腹泻率、新城疫(ND)抗体效价、血清生化指标、血清免疫球蛋白指标、血常规指标、免疫器官指数、肠道消化酶活性、盲肠微生物、肠黏膜形态结构等指标来评价芽孢杆菌制剂在肉鸡生产上的应用效果,结果表明枯草杆菌制剂能够促进肉鸡的生长、提高其免疫性能。
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