产乙酸微生物的分离、诱变及产酸性能研究

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近年来,城市生活垃圾的产生持续增多且组成复杂,有机物含量的增加尤为明显,对环境及人类的危害严重。因此,有效处理生活垃圾成为一个亟待解决的问题。厌氧消化法因能够实现垃圾处理的减量化、无害化和资源化,已成为垃圾处理技术发展研究的重点。厌氧消化过程中乙酸产生是影响甲烷产量的关键,以乙酸为基质生产的甲烷约占甲烷总量的70%。然而,乙酸菌的适宜生长环境与甲烷菌有一定差异,相对传统厌氧消化法,两相联合厌氧消化法受到研究者的广泛关注。但是能分离出的纯厌氧乙酸菌株相对较少,研究也不深入。鉴于此,本文力求通过乙酸菌的筛选、分离、培养条件的优化等研究,为垃圾的微生物降解提供菌种来源。实验从垃圾处理厂的污泥中筛选得到一株好氧乙酸菌,命名为PA-1菌,并对其进行革兰氏染色、扫描电镜、生理生化等实验研究,结果显示PA-1菌为革兰氏阳性菌,细胞为短杆状,单个或成对出现,大小为(8-11) μm×(40-55) μm,好氧生存,无运动性,能水解淀粉,分解葡萄糖产气,结合《伯杰菌种鉴定手册》及16S rDNA序列分析结果,将PA-1菌归属为假单胞杆菌属。实验通过单因素法确定了PA-1菌的最适生长条件,即温度为37.0℃,pH值为4.5,乙醇含量8%(v/v),碳源为葡萄糖,接入活化菌液为9%(v/v),摇床转速为120r/min。在最适条件下,测得PA-1菌培养30h产酸量达到最大为0.402g/L。在此条件下,绘制了PA-1的生长曲线,可知0~6h为它的延迟生长期,6~22h为对数生长期,22h之后进入稳定期。通过红外和紫外光谱研究,进一步确证了PA-1菌的代谢产物为乙酸。此外,实验选定紫外诱变法对PA-1菌进行诱变,以提升该菌的代谢产酸性能,最终确定最佳紫外诱变时间为25s,三次传代性能较稳定,最大产酸量为0.487g/L,较原菌产酸量提高了21%。本文筛选、优化得到好氧乙酸菌,该菌使得产乙酸过程在好氧环境中进行,有利于乙酸菌的生长代谢。本文的研究结果将为研究人员进一步研究乙酸菌的代谢性能提供了基础数据和菌种来源,近而为后续产甲烷菌代谢产气性能的研究奠定了基础。
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